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超氧化物歧化酶在酵母细胞耐高温过程中作用的研究

作　者: 孙亮
导　师: 朱志兀
学　校: 郑州大学
专　业: 有机化学
关键词: 酵母 Fe-SOD Mn-SOD CUP1 热激耐高温 SOD活性
分类号: Q26
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 66次
引　用: 1次
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内容摘要

自从研究发现热休克蛋白以来,细胞如何抵抗热激的机制一直是研究领域的热点,虽然有关热休克蛋白的研究已很透彻,但是究竟细胞是如何抵抗高温刺激这一课题还是没有得到确切的阐述。本论文以单细胞真核生物酵母为研究模型,在实验室研究发现抗氧化酶Cu,Zn-SOD1的耐高温生理功能的基础上,进一步发现FeSOD和MnSOD也具有耐高温的功能,这些发现表明耐高温可能是超氧化歧化酶的一个普遍生理功能。SOD1基因在细胞抗热激过程中发挥了关键性作用,本论文利用其它两种SOD,即来源于大肠杆菌的Fe-SOD和超嗜热泉古菌好氧火棒菌的Mn-SOD,来探讨SOD1是怎样在细胞耐高温中起到重要作用的。本论文分别将这两种外源的SOD基因在sodlΔ酵母菌株中表达,结果表明这两种SOD在sodlΔ突变株中的表达可以使细胞恢复在非生理温度39℃高温下的生长。这些研究结果表明耐高温可能是超氧化歧化酶的一个普遍生理功能。此外本论文研究了一个已知基因CUP1是否在细胞耐高温中起作用。文献报道CUP1能够部分替代SOD1的抗氧激的功能：我们的研究结果表明CUP1的过表达不能替代SOD1在细胞耐高温中的作用。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-6
目录  6-8
第一章绪论  8-20
  1.1 超氧化物岐化酶的研究进展  8-18
    1.1.1 超氧化物岐化酶概况  8-9
    1.1.2 超氧化物歧化酶的分类与分布  9
    1.1.3 超氧化物歧化酶的理化性质  9-10
    1.1.4 超氧化物歧化酶的结构  10-13
    1.1.5 超氧化物岐化酶与细胞的抗氧化能力  13-14
    1.1.6 超氧化物歧化酶基因表达的调控  14-15
    1.1.7 超氧化物歧化酶与人类疾病  15-17
    1.1.8 超氧化物歧化酶的应用  17-18
  1.2 超氧化物歧化酶真正的生理功能:耐高温功能  18-20
第二章 Fe-SOD在细胞耐高温过程中作用的研究  20-29
  2.1 实验设计  20-21
  2.2 实验材料和实验步骤  21-26
    2.2.1 实验材料  21-22
    2.2.2 实验步骤  22-26
  2.4 实验结果与讨论  26-29
第三章 Mn-SOD在细胞耐高温过程中作用的研究  29-41
  3.1 实验材料  30-31
    3.1.1 实验材料  30
    3.1.2 本实验所用到的质粒  30-31
  3.2 实验步骤  31-38
    3.2.1 构建pRS426GPDMn-SOD和SK+ Mn-SOD质粒  31-36
    3.2.2 酵母的转化  36
    3.2.3 细胞耐高温活性分析  36-37
    3.2.4 SOD活性测定实验  37-38
  3.3 实验结果及讨论  38-41
第四章 CUP1对细胞耐高温能力的影响  41-48
  4.1 酵母CUP1基因的研究进展  41-43
  4.2 实验材料  43
  4.3 实验步骤  43-46
  4.4 实验结果与讨论  46-48
参考文献  48-52
附录  52-59
  附录A  52-53
  附录B  53
  附录C  53-54
  附录D  54-55
  附录E  55-57
  附录F  57-58
  附录G  58-59
个人简历  59-60
致谢  60

超氧化物歧化酶在酵母细胞耐高温过程中作用的研究

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