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拮抗酵母菌抑菌机理及对草莓采后冷藏品质影响的研究

作　者: 王晓冬
导　师: 肖红梅
学　校: 南京农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 季也蒙毕赤酵母灰葡萄孢草莓生物防治采后病害机理
分类号: S668.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

草莓在我国种植面积大、产量高,营养丰富,富含氨基酸、维生素C等多种营养物质,深受国内外消费者的喜爱。但草莓果皮极薄,组织娇嫩,在采收、贮藏过程中极易受损伤而遭受病原微生物侵染导致果实腐烂,造成极大地经济损失。利用安全无毒的生物防治已逐渐成为一种控制水果采后病害的新途径,具有巨大的应用前景。因此,研究拮抗微生物对水果采后病害的防治效果及作用机理,具有重要的理论和现实意义。通过体外实验,研究以季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)为拮抗菌对水果采后病害灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的抑制效果。PDA平板对峙培养实验结果显示,季也蒙毕赤酵母对灰葡萄孢的抑制效果非常明显,在划线接种季也蒙毕赤酵母的平板上抑制了灰葡萄孢的蔓延；在抑菌圈实验中,季也蒙毕赤酵母生长速度快于灰葡萄孢孢子的生长速度,能够快速的在营养及空间方面占有优势从而有效抑制灰葡萄孢的生长,但是不能产生抑菌圈;通过不同浓度5×105、5×106、5×107、5×108、5×109CFU/mL的季也蒙毕赤酵母菌悬液对灰葡萄孢孢子萌发的影响,发现酵母菌悬液浓度越高,抑制效果越明显。活体实验中,以南京市马群草莓生产基地的“丰香”草莓为试验材料,研究了P.guilliermondi的抑菌作用机理,结果表明,不同浓度P. guilliermondi能显著抑制草莓采后灰葡萄孢病斑直径的扩展,且菌悬液浓度越高,抑制效果越好,推测营养与空间竞争可能是P. guilliermondi抑制治病霉菌的主要方式；此外,P. guilliermondi能激发与果实抗性相关的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶的活性(PAL),保持较低的丙二醛(MDA)含量,因此诱导果实的自身抗性可能也是P.guilliermondi抑菌机制的一部分。对草莓采后冷藏草莓果实品质的影响实验结果发现,季也蒙毕赤酵母菌悬液处理对果实呼吸强度影响很小,但可以保持果实的光泽和可溶性固形物含量,并显著减小失重率、维持果实硬度,从而延缓草莓果实的衰老,延长草莓的贮藏寿命。因此,P.guilliermondi在草莓果实采后防腐保鲜中具潜在的商业应用前景。

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摘要 7-8ABSTRACT 8-10引言 10-28 1 水果采后病害的致病因子及影响机制 11-12 1.1 采后病原菌的致病因子 11 1.2 采后病原菌的潜伏机理及其激活 11 1.3 采后病原真菌的侵染途径 11-12 2 采后果实病害的控制方法 12-14 2.1 利用化学方法对采后果实病害的控制 12-13 2.2 利用物理方法对采后果实病害的控制 13-14 2.3 利用生物学方法对果实采后病害的控制 14 3 拮抗细菌作为生防因子的应用 14-16 3.1 拮抗细菌的种类 14 3.2 拮抗细菌作为生防菌的优势 14-15 3.3 拮抗细菌产生的主要拮抗物质 15 3.4 拮抗细菌的抑菌作用机理 15-16 3.5 拮抗细菌应用的问题与展望 16 4 拮抗酵母菌作为生防因子的应用 16-21 4.1 拮抗酵母菌的种类 16-17 4.2 拮抗菌酵母的分离与筛选 17 4.3 拮抗酵母菌的抑制作用机理 17-19 4.4 拮抗酵母菌生防效力的改良 19-20 4.5 当前生物活体杀菌剂研制中存在的问题 20-21 5 植物内生菌作为生防因子的应用 21-22 5.1 植物内生菌的概念 21 5.2 植物内生菌的作用 21-22 6 季也蒙毕赤氏酵母在生物防治中的应用 22-23 6.1 季也蒙毕赤氏酵母的研究进展 22-23 6.2 季也蒙毕赤氏酵母的应用 23 7 本研究的目的和意义 23-25 参考文献 25-28第二章拮抗酵母菌对灰葡萄孢的抑制作用 28-36 1 材料与方法 28-31 1.1 实验材料 29 1.2 仪器设备 29 1.3 拮抗酵母菌培养及菌悬液的制备 29-30 1.4 病原菌培养和孢子悬浮液的制备 30 1.5 测定指标及方法 30-31 1.6 数据分析 31 2 结果与分析 31-34 2.1 对峙培养中季也蒙毕赤酵母对灰葡萄孢的抑制效果 31-32 2.2 不同浓度酵母菌悬液对灰葡萄孢孢子萌发率的影响 32 2.3 不同浓度酵母菌悬液对灰葡萄孢孢子抑菌圈的影响 32-33 2.4 不同酵母菌处理液对灰葡萄孢孢子萌发率的影响实验 33-34 3 讨论与结论 34-35 参考文献 35-36第三章拮抗酵母菌对草莓灰葡萄孢病抑制机理的研究 36-45 1 材料和方法 36-39 1.1 主要仪器 36-37 1.2 拮抗酵母菌培养及菌悬液的制备 37 1.3 病原菌培养和孢子悬浮液的制备 37 1.4 水果的预处理 37 1.5 指标测定及方法 37-39 1.6 数据分析 39 2 结果与分析 39-42 2.1 不同浓度酵母菌悬液对草莓病斑直径的影响 39-40 2.2 季也蒙毕赤酵母对草莓MDA的影响 40 2.3 季也蒙毕赤酵母对草莓SOD的影响 40-41 2.4 季也蒙毕赤酵母对草莓CAT的影响 41-42 2.5 季也蒙毕赤酵母对草莓PAL的影响 42 3 讨论与结论 42-44 参考文献 44-45第四章拮抗酵母菌对草莓采后冷藏品质的影响 45-54 1 材料和方法 45-47 1.1 主要仪器 45 1.2 拮抗酵母菌培养及菌悬液的制备 45 1.3 病原菌培养和孢子悬浮液的制备 45 1.4 水果的预处理 45-46 1.5 测定指标及方法 46-47 1.6 数据分析 47 2 结果与分析 47-51 2.1 贮藏期间草莓呼吸强度的变化 47-48 2.2 贮藏期间草莓硬度的变化 48 2.3 贮藏期间草莓可溶性固形物的变化 48-49 2.4 贮藏期间草莓色差的变化 49-50 2.5 贮藏期间草莓失重率的变化 50-51 2.6 贮藏期间草莓腐烂指数的变化 51 3 讨论与结论 51-53 参考文献 53-54全文总结 54-56 1 拮抗酵母菌对灰葡萄孢的抑制作用 54 2 拮抗酵母菌对草莓灰葡萄孢病抑制机理的研究 54 3 拮抗酵母菌对草莓采后冷藏品质的影响 54-56致谢 56-58攻读硕士期间发表的论文 58

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