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乳腺钠/碘转运体表达与功能的调控研究

作　者: 贾悦
导　师: 王笑云；刘超
学　校: 南京医科大学
专　业: 内科学
关键词: 乳腺癌钠碘转运体(NIS) 基因蛋白表达调控
分类号: R737.9
类　型: 博士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

目的 1．研究正常和良／恶性乳腺肿瘤组织中钠碘转运体（NIS）基因和蛋白的表达情况，探讨NIS与乳腺肿瘤疾病之间的关系。 2．研究甾体激素、促甲状腺激素（TSH）、三碘甲腺原氨酸（T3）、碘化钠和细胞因子对乳腺癌细胞钠碘转运体（NIS）基因表达的影响，探讨乳腺癌NIS基因表达和调控的因素。 3．研究维甲酸（RA）、泌乳素（PRL）和瘦素（leptin）对乳腺癌细胞钠碘转运体（NIS）基因、蛋白表达和摄碘功能的影响，探讨其与乳腺生理功能调控和病理变化之间的内在联系。方法 1．乳腺组织取自乳腺纤维瘤、乳腺小叶增生以及乳腺癌患者，另取癌旁正常乳腺组织作为对照，分别运用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western Blot方法和免疫组织化学技术检测NIS的基因和蛋白表达情况。 2．两株乳腺癌细胞（MCF-7和MDA-MB-453）进行培养，分别给予不同浓度的甾体激素（包括雌二醇、孕酮、睾酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮或地塞米松等）、TSH、T3及碘化钠或细胞因子（包括肿瘤坏死因子-α（TNF-α），干扰素-γ（IFN-γ），白细胞介素-6（IL-6））刺激72小时。采用RT-PCR方法检测细胞中NIS的mRNA表达情况。 3．采用乳腺癌细胞MCF-7进行培养，分别给予不同浓度的RA、PRL和瘦素进行刺激72小时或同浓度刺激不同时间。分别采用RT-PCR、Western blot和细胞免疫化学方法检测细胞中NIS的mRNA和蛋白表达，并用¹²⁵I测定细胞对碘摄取的能力。结果 1．癌旁正常乳腺组织和良性乳腺肿瘤组织未检出NIS基因的蛋南京医科大学博士学位论文白表达，而乳腺癌组织均见MS基因和蛋白的表达，但免疫组织化学结果显示MS蛋白主要表达在乳腺癌细胞胞浆中。 2.两株乳腺癌细胞在经过雌二醇、孕酮及肇酮或TSH、T3刺激后，细胞中NIS的mRNA表达比对照组有明显增加，并且与刺激物浓度成正相关。双氢辜酮或脱氢表雄酮对乳腺癌细胞中MS的mRNA表达没有明显影响。而经过地塞米松或碘化钠以及细胞因子TNF一a，IFN一Y，lL一6刺激后，细胞中Nls的mRNA表达比对照组有明显降低，并与刺激物浓度成反比。 3.乳腺癌细胞MCF一7在经过RA、PRL和瘦素刺激后，Nls mRNA和蛋白的表达比对照组明显增加，并与刺激物浓度成正比;且MSmRNA表达与刺激时间也成正比。免疫细胞化学染色的结果显示，经过RA和瘦素刺激的Nls蛋白染色在细胞内主要呈颗粒状浓集分布，而经过PRL刺激的NIS蛋白染色在细胞内主要呈均匀分布。而且，RA和瘦素使乳腺癌细胞的摄碘功能明显增强，PRL培养的细胞摄碘功能并无明显变化。结论乳腺癌NIS基因和蛋白表达受苗体激素、TSH、T3、碘化钠、细胞因子、RA、PRL和瘦素等多种因素调控，但摄碘功能的恢复需要Nis蛋白功能正常化，本研究中只发现RA和瘦素有此调节作用。MS蛋白翻译和翻译后水平的缺陷可能是乳腺癌组织摄碘能力下降的原因之一。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
第一部分乳腺癌组织钠碘转运体的表达及意义  9-27
  第一节乳腺癌组织钠碘转运体基因表达的研究  9-16
    摘要  9-11
    引言  11
    材料与方法  11-13
    结果  13
    讨论  13-14
    参考文献  14-16
  第二节乳腺癌组织钠碘转运体蛋白表达的研究  16-27
    摘要  16-18
    引言  18
    材料与方法  18-22
    结果  22-24
    讨论  24-25
    参考文献  25-27
第二部分乳腺癌细胞细胞钠碘转运体基因表达的调控  27-62
  第一节甾体激素对乳腺癌细胞细胞钠碘转运体的调控  27-41
    摘要  27-29
    引言  29
    材料与方法  29-32
    结果  32-36
    讨论  36-38
    参考文献  38-41
  第二节甲状腺相关激素和碘对乳腺癌细胞细胞钠碘转运体的调控  41-53
    摘要  41-43
    引言  43
    材料与方法  43-45
    结果  45-47
    讨论  47-50
    参考文献  50-53
  第三节细胞因子对乳腺癌细胞钠碘转运体的调控  53-62
    摘要  53-55
    引言  55
    材料与方法  55-57
    结果  57-59
    讨论  59-60
    参考文献  60-62
第三部分乳腺癌细胞钠碘转运体表达和摄碘功能关系的研究  62-113
  第一节维甲酸对乳腺癌细胞钠碘转运体表达和摄碘功能关系的研究  62-78
    摘要  62-64
    引言  64
    材料与方法  64-71
    结果  71-74
    讨论  74-76
    参考文献  76-78
  第二节泌乳素对乳腺癌细胞钠碘转运体表达和摄碘功能关系的研究  78-94
    摘要  78-80
    引言  80
    材料与方法  80-86
    结果  86-90
    讨论  90-92
    参考文献  92-94
  第三节瘦素对乳腺癌细胞钠碘转运体表达和摄碘功能影响的研究  94-113
    摘要  94-96
    引言  96
    材料与方法  96-103
    结果  103-108
    讨论  108-110
    参考文献  110-113
附录一: 在读期间发表论著及综述  113-115
附录二: 综述与参考文献  115-138
附录三: 相关研究  138-160
致谢  160-161

乳腺钠/碘转运体表达与功能的调控研究

内容摘要

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