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冬凌草甲素调控周期相关蛋白抑制SGC-7901细胞增殖作用的研究
作 者: 洪宝
导 师: 季宇彬
学 校: 哈尔滨商业大学
专 业: 药理学
关键词: 冬凌草甲素 人胃癌SGC-7901细胞 α微管蛋白 CyclinB1蛋白 Cdk1蛋白 细胞周期
分类号: R285
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
我国早就有关于冬凌草甲素抗肿瘤的报道,发现冬凌草甲素具有广谱抗肿瘤作用,同时通过研究其作用机理,发现冬凌草甲素主要通过能影响肿瘤细胞的周期及其凋亡机制来抑制肿瘤的增殖,但对SGC-7901的细胞周期阻滞作用机制较少有人研究,因此本课题主要通过体外研究探讨冬凌草甲素对SGC-7901抗肿瘤作用机制。本文采用MTT法检测冬凌草甲素对SGC-7901、HepG2、Lovo三种肿瘤细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测冬凌草甲素对SGC-7901细胞周期的影响;激光共聚焦法检测冬凌草甲素对α微管蛋白的影响;Western-Blot法检测冬凌草甲素对Cdk1、CyclinB1两种蛋白表达的影响。实验结果表明,冬凌草甲素对体外培养的人胃癌SGC-7901、人肝癌HepG2、人肠癌Lovo细胞均具有较强的抑制作用,IC50值分别是15.64、25.50、18.79μM;流式细胞仪检测结果表明,给药24 h后冬浚草甲素能够使SGC-7901细胞Go/G1期比例降低,S期和G2/M期的比例明显升高;给药48h,G0/G1期比例降低, G2/M期比例明显升高;激光共聚焦检测结果表明,SGC-7901细胞经冬凌草甲素处理后,α微管蛋白合成受阻,微管消失,细胞有丝分裂受阻;采用Western-Blot法检测冬凌草甲素对Cdk1、CyclinB1两种蛋白表达的影响,结果显示Cdkl和CyclinB1蛋白的表达量随着冬凌草甲素浓度的增大显著降低。综上所述我们认为,冬凌草甲素通过下调Cdk1、CyclinB1两种周期蛋白的表达,抑制α微管蛋白合成,最终将SGC-7901细胞阻滞在G2/M期,从而抑制SGC-7901细胞生长。
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全文目录
摘要 5-6Abstract 6-111 绪论 11-23 1.1 肿瘤的概述 11-15 1.1.1 肿瘤的概念 11 1.1.2 肿瘤发病的原因 11-12 1.1.3 近年来抗肿瘤药物的研究进展 12-15 1.2 国内外冬凌草甲素抗肿瘤研究现状及分析 15-21 1.2.1 冬凌草甲素的来源与结构 15 1.2.2 冬凌草甲素的抗肿瘤作用 15-18 1.2.3 冬凌草甲素抗肿瘤作用原理 18 1.2.4 冬凌草甲素阻断细胞周期的分子机制 18-21 1.3 本课题来源及研究意义 21-23 1.3.1 课题来源 21-22 1.3.2 本课题研究的目的与意义 22 1.3.3论文的研究内容 22-232 冬凌草甲素甲素对人SGC-7901、HepG2、Lovo三种细胞增殖的抑制作用 23-25 2.1 引言 23 2.2 实验部分 23-24 2.2.1 材料、仪器及试剂 23 2.2.2 实验方法 23-24 2.3 结果分析 24 2.4 本章小结 24-253 冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞细胞周期的影响 25-30 3.1 引言 25 3.2 实验部分 25-26 3.2.1 实验材料、仪器及试剂 25-26 3.2.2 实验方法 26 3.3 结果分析 26-29 3.4 本章小结 29-304 冬凌草甲素对SGC-7901细胞α微管蛋白形成的影响 30-34 4.1 引言 30 4.2 实验部分 30-31 4.2.1 实验材料、仪器及试剂 30-31 4.2.2 实验方法 31 4.3 结果分析 31-33 4.4 本章小结 33-345 冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞机制的研究 34-42 5.1 引言 34 5.2 实验部分 34-39 5.2.1 实验材料、仪器及试剂 34-37 5.2.2 Western Blot法分析蛋白表达 37-39 5.3 结果分析 39-41 5.3.1 冬凌草甲素对SGC-7901细胞内CyclinB1蛋白表达的影响 39-40 5.3.2 冬凌草甲素对SGC-7901细胞内Cdk1表达的影响 40-41 5.4 本章小结 41-426 讨论 42-44参考文献 44-51攻读学位期间发表的学术论文 51-52致谢 52
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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