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雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤细胞周期与凋亡的影响及其机制的探讨

作　者: 刘媛
导　师: 陈燕
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: 雷公藤内酯醇细胞周期凋亡周期调控蛋白细胞核因子
分类号: R733.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:观察雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖、周期和凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用MTT比色法检测RPMI-8226细胞的增殖活性,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡,采用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡形态学的改变,流式细胞术分析细胞周期的改变,RT-PCR检测雷公藤内酯醇对RPMI-8226细胞内P21wap1/cip1和P27 kip1基因表达的影响,Western blot法检测雷公藤内酯醇对RPMI-8226细胞内P21wap1/cip1、P27 kip1、NF-κB/p65和IκBα蛋白表达的影响,免疫荧光共聚焦技术观察雷公藤内酯醇对RPMI-8226细胞内NF-κB/p65和IκBα定位的影响。结果:(1)雷公藤内酯醇以时间、剂量依赖方式抑制RPMI-8226细胞增殖,其36 h的IC50值为121.76±2.01nmol/L。(2)雷公藤内酯醇以剂量依赖方式诱导RPMI-8226细胞凋亡,且伴有典型的凋亡细胞形态学改变。(3)雷公藤内酯醇阻滞RPMI-8226细胞周期于G0/G1期。(4)雷公藤内酯醇以剂量依赖方式上调RPMI-8226细胞内周期调控蛋白P21wap1/cip和P27 kip1的表达水平。此外,IκBα的表达增加,而细胞核因子NF-κB/p65的表达减少。(5)雷公藤内酯醇干预后IκBα在RPMI-8226细胞浆内的表达增加,而NF-κB/p65在细胞核内的表达减少。结论:雷公藤内酯醇能够抑制RPMI-8226细胞增殖、阻滞细胞周期进程并诱导其凋亡,其抗肿瘤效应与其调控P21wap1/cip与P27 kip1、NF-κB/p65与IκBα的表达有关。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-8
前言  8-13
第一部分雷公藤内酯醇对人多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖抑制及周期阻滞作用  13-30
  材料与方法  13-22
  结果  22-26
  讨论  26-28
  参考文献  28-30
第二部分雷公藤内酯醇抑制 NF-κB 通路介导人多发性骨髓瘤细胞株RPMI-8226 凋亡  30-43
  材料与方法  30-35
  结果  35-39
  讨论  39-41
  参考文献  41-43
综述  43-50
  参考文献  47-50
附录攻读硕士学位期间发表文章  50-51
致谢  51

雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤细胞周期与凋亡的影响及其机制的探讨

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