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骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用

作 者: 徐凤
导 师: 王爱玲
学 校: 安徽医科大学
专 业: 内科学
关键词: 心肌缺血 再灌注损伤 骨髓间充质干细胞 细胞凋亡 大鼠
分类号: R542.22
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


背景:急性心肌梗死用溶栓或介入手段开通阻塞血管后,因心肌缺血-再灌注损伤而很难达到满意的疗效。目的:本研究将体外分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞,提前一周移植到大鼠心肌,待细胞定植一周后再构建大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,观察骨髓间充质干细胞心肌预移植对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的修复作用。方法:①干细胞分离、培养及鉴定:采用贴壁法结合消化控制法体外培养骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达。取健康3周龄SPF级小鼠的骨髓细胞悬液,进行BMSCs体外扩增培养。②实验方案:48只受体大鼠随机分成4组,每组12只:对照组、假手术组、缺血-再灌注组(IR组)、骨髓间充质干细胞移植组(BMSCs组)。受体SD大鼠接受骨髓间充质干细胞或无血清DMEM培养基心肌注射1周后建立心肌缺血再灌注损伤模型,心肌缺血0.5 h再灌注2 h后测定血清乳酸脱氢酶(LDH)水平、心肌组织总超氧化物歧化酶(TSOD)活力及丙二醛(MDA)水平;观察心肌组织超微结构的改变;采用缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达变化。结果:分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞增殖旺盛,纯度较高,且均质性和稳定性好。与假手术组相比,缺血-再灌注组乳酸脱氢酶的漏出增加,总超氧化物歧化酶活性降低,丙二醛含量增加(P <0.01);心肌超微结构损伤明显加重;缺血-再灌注组心肌细胞凋亡指数显著高于假手术组(P <0.01);缺血-再灌注组Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达高于假手术组(P <0.01),Bax/Bcl-2比值高于假手术组(P <0.05)。与缺血-再灌注组相比,骨髓间充质干细胞移植组乳酸脱氢酶的漏出减少,总超氧化物歧化酶活性增加,丙二醛含量减少(P < 0.01);心肌超微结构损伤减轻;骨髓间充质干细胞移植组心肌细胞凋亡指数显著低于缺血再灌注组(P < 0.01);骨髓间充质干细胞移植组Bcl-2蛋白表达高于缺血再灌注组(P < 0.05),Bax/Bcl-2比值低于缺血再灌注组(P <0.05)。结论:骨髓间充质干细胞预移植对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的修复可起促进作用。

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英文缩略词表  5-6中文摘要  6-8Abstract  8-10前言  10-11材料和方法  11-21结果  21-28讨论  28-33本课题的局限性  33结论  33参考文献  33-37综述  37-45  参考文献  44-45

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管(循环系)疾病 > 心脏疾病 > 心肌疾病 > 心肌梗塞
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