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新型光敏剂CPD4联合阿霉素对MCF-7细胞增殖及周期作用的研究

作　者: 冷玲
导　师: 佟仲生
学　校: 天津医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 光动力效应流式细胞术细胞周期凋亡
分类号: R73-3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:新型光敏剂CPD4联合阿霉素（ADM）对MCF-7细胞增殖和周期的研究。从细胞水平、物理学角度阐述ADM对新型光敏CPD4光动力效应产生影响的作用机制,为临床开辟新的治疗方法提供理论依据。方法:实验分为六个阶段进行。分别采用MTT比色法筛选阿霉素浓度;分析阿霉素与光敏剂CPD4的光谱特点,测两者混合液的吸收光谱,观察阿霉素对CPD4吸收光谱的影响;染料排斥法观察各组细胞的抑制率;应用流式细胞术分析各组细胞凋亡率;用流式细胞术分析各组细胞周期的变化及测量细胞平均荧光强度。结果:1、ADM对MCF-7细胞抑制率有明显的时间-浓度依赖效应,低浓度组为10ng/ml、20 ng/ml,对MCF-7细胞的抑制率＜10%,高浓度组50 ng/ml对MCF-7细胞的抑制率＜25%。2、阿霉素的两个吸收峰位于233nm、480nm。ADM与光敏剂的混合溶液的荧光光谱显示,两者的荧光峰发生蓝移。3、ADM预处理MCF-7细胞24小时、48小时后加入CPD4孵育2小时光照,24小时后0.2%伊红排斥法测细胞抑制率,倒置显微镜下观察,初步显示ADM能增强CPD4的光动力效应。4、流式细胞仪分析细胞凋亡率结果显示ADM预处理后能够增加CPD4对MCF-7的光动力效应。5、ADM预处理MCF-7细胞相应的时间,24小时后分析细胞周期,细胞主要阻滞在G₂/M期。PDT主要将细胞阻滞在G₀/G₁。联合用药组主要将细胞阻滞在G₂/M期。6、ADM（20ng/ml）预处理MCF-7细胞,对细胞荧光强度无明显影响;CPD4孵育2小时后对照组荧光强度较平稳,ADM预处理24小时、48小时组细胞荧光强度逐渐降低。三组细胞的荧光强度均在CPD4孵育2小时最高,且ADM预处理48小时组＞预处理24小时＞对照组。结论:1、ADM 3个浓度分别为10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml。2、ADM对细胞无光动力效应;混合溶液荧光光谱显示ADM可能与光敏剂结合,实验中避免同时给药。3、染料排斥法观察各组细胞死亡率初步表明ADM预处理细胞能增强光动力效应,且未增加CPD4的暗毒性及光照毒性。4、流式细胞术分析各组细胞凋亡率证实ADM预处理细胞能增强光动力效应,且未增加CPD4的暗毒性及光照毒性。5、ADM、PDT可以将MCF-7细胞阻滞到不同的细胞周期。6、ADM预处理MCF-7细胞后能增加光敏剂进入细胞的量,为ADM增强CPD4对细胞的光动力效应提供理论基础。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-9
符号说明  9-11
前言  11-13
  研究现状、成果  11-12
  研究目的、方法  12-13
新型光敏剂CPD4联合阿霉素对MCF-7细胞增殖和周期作用的研究  13-50
  1.对象与方法  13-22
  2.结果  22-42
  3.讨论  42-49
  4.小结  49-50
结论  50-51
参考文献  51-56
发表论文和参加科研情况说明  56-57
综述  57-63
  乳腺癌光动力疗法的研究进展  57-61
  综述参考文献  61-63
致谢  63

新型光敏剂CPD4联合阿霉素对MCF-7细胞增殖及周期作用的研究

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