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人工合成抗菌肽体外抑菌作用的实验研究

作　者: 陈钰
导　师: 李凡
学　校: 吉林大学
专　业: 病原生物学
关键词: 抗菌肽最低抑菌浓度合成抑菌作用
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 396次
引　用: 2次
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内容摘要

由于抗生素的滥用,不可避免地导致耐药微生物的产生,对人类自身生存和发展产生很大的威胁。而解决微生物耐药问题的一个有效途径就是研制出与传统抗生素作用机制不同的新型抗菌药。抗菌肽是生物体内经诱导产生的一类具有生物活性的小分子抗菌肽,广泛地存在于自然界中,抗菌活性具有高效性、稳定性、快速、能与免疫系统相互作用等特点。杂合抗菌肽是一类新型抗菌肽,它由来自一种或多种抗菌肽的部分肽链组成,具有高效、广谱、低毒、肽链较短等特点。人工设计杂合肽是研究的热点之一,即选择一种抗菌肽为蓝本,对某个或某些氨基酸做删减替换或与另外一种抗菌肽的片段拼接。研究表明,一些经过的改造的抗菌肽具有与母本相似甚至更高的活性,毒副作用降低,而且变短的肽链为降低合成成本也奠定了基础。探索并设计新肽,改善原有抗菌肽的活性,降低合成成本等对解决目前抗菌肽广泛应用存在的问题都有着重要的意义。本实验根据抗菌肽(AMPs)结构和功能的关系,以抗菌肽V-13K为模板,进行24位氨基酸的替换,采用化学合成的方法得到两种人工设计的新型抗菌肽;用分光光度法测出细菌的OD值与浓度的对应关系,采用高效液相色谱分析合成后的抗菌肽的疏水性;采用微量肉汤稀释法测定人工合成抗菌肽的最低抑菌浓度。通过改造前后的疏水性和MIC的变化,对改造的抗菌肽进行评价,进而为抗菌肽改造提供理论依据。

全文目录

提要  4-7
中英文缩略词对照表  7-8
第1章前言  8-24
  1.1 抗菌肽研究进展  8-21
    1.1.1 抗菌肽的发现  8-9
    1.1.2 抗菌肽的性质与分类  9-11
    1.1.3 抗菌肽的生物学活性  11-13
    1.1.4 抗菌肽的作用机理  13-16
    1.1.5 抗菌肽的化学合成  16-19
    1.1.6 抗菌肽的应用前景  19-20
    1.1.7 抗菌肽研究中存在的问题  20-21
  1.2 MIC实验方法比较  21-22
    1.2.1 常量肉汤稀释法  21
    1.2.2 E实验（E-test法）  21-22
    1.2.3 微量肉汤稀释法  22
  1.3 研究目的及意义  22-24
第2章实验内容  24-42
  2.1 实验材料  24-27
    2.1.1 菌株  24
    2.1.2 抗菌肽  24-25
    2.1.3 主要试剂与耗材  25-26
    2.1.4 仪器设备  26
    2.1.5 主要试剂的配制  26-27
  2.2 实验方法  27-30
    2.2.1 细菌OD值与浓度的标准曲线测定  27-28
    2.2.2 抗菌肽的合成纯化  28
    2.2.3 抗菌肽疏水性测定  28-29
    2.2.4 V13K 在LB 与MHB培养基中MIC比较  29
    2.2.5 抗菌肽最低抑菌浓度实验  29-30
  2.3 实验结果  30-37
    2.3.1 十二株细菌的标准曲线  30-34
    2.3.2 抗菌肽疏水性  34
    2.3.3 L-V13K在不同培养基中MIC  34-35
    2.3.4 抗菌肽MIC实验结果  35-37
  2.4 讨论  37-42
第3章结论  42-43
参考文献  43-49
导师及作者简介  49-50
致谢  50-51
中文摘要  51-53
Abstract  53-54

人工合成抗菌肽体外抑菌作用的实验研究

内容摘要

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