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鸡体实验法及同工酶谱分析检测柔嫩艾美耳球虫的耐药性
作 者: 王凤
导 师: 曾明华;祁克宗
学 校: 安徽农业大学
专 业: 基础兽医学
关键词: 柔嫩艾美耳球虫 鸡体实验法 耐药性 同工酶 氯氟苄腺嘌
分类号: S858.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
鸡球虫是由艾美耳属一种或多种球虫寄生于鸡体内所引起的呈世界性分布的原虫病,该病对雏鸡的危害十分严重,给养鸡业造成了巨大的经济损失。鸡球虫种类多,其中致病性最强的是柔嫩艾美耳球虫。到目前为止,鸡球虫病的防治仍以药物控制为主,但由于抗球虫药的长期使用,鸡球虫耐药性的产生已成为无法避免的问题。为探索一种合理的用药方案,并检测鸡球虫耐药性的产生情况,实验采集了安庆、肥东及巢湖三个地区的3株盲肠球虫,进行了柔嫩艾美耳球虫(E.tellena)单卵囊的分离;并采用鸡体实验法,以抗球虫指数(ACI)、病变记分减少率(RLS)、相对盲肠卵囊产量(ROP)和最适抗球虫活性百分率(POAA)四项指标综合判定,检测了安庆、肥东及巢湖三个地区的3株E.tenenlla对当前这些地区相对常用的4种药物-癸氧喹酯、尼卡巴嗪、球痢灵和磺胺氯吡嗪钠这四种药物的耐受性产生状况。其结果显示:安庆株、肥东株、巢湖株对癸氧喹酯的四项指标都呈阴性,表现为敏感;对尼卡巴嗪均的四项指标都呈阳性,表现为完全耐药。安庆株对球痢灵的四项指标检测结果为:ACI 160.70(-)、RLS 85.77(-)、POAA 33.35(+)、ROP 17.82(+),中度耐药;安庆株对磺胺氯吡嗪钠的四项指标检测结果为:ACI 140.52(+)、RLS 78.45(-)、POAA 32.96(+)、ROP 30.46(+),重度耐药。肥东株对球痢灵的四项指标检测结果为:ACI 148.02(+)、RLS 90.81(-)、POAA 51.79(-)、ROP 9.04(-),轻度耐药;肥东株对磺胺氯吡嗪钠的四项指标检测结果为:ACI 139.02(+)、RLS 81.34(-)、POAA 44.96(+)、ROP 42.16(+),重度耐药。巢湖株对球痢灵的四项指标检测结果为ACI 150.22(+)、RLS 76.15(-)、POAA 45.18(+)、ROP 37.57 (+),重度耐药;巢湖株对磺胺氯吡嗪钠的四项指标检测结果为:ACI 96.05(+)、RLS 27.59(+)、POAA 11.33(+)、ROP 48.73(+),完全耐药。根据3株E.tenenlla耐药性的产生情况,实验还采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳,以上海敏感标准E.tellena株和南京敏感标准E.tellena株为参照,分析了该3株E.tenella球虫的乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸葡萄糖异构酶(GPI)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)同工酶谱,尼卡巴嗪、磺胺氯吡嗪钠耐药后都有一条LDH特异性同工酶谱,尼卡巴嗪还有一条GPI特异性同工酶谱,但是球虫对尼卡巴嗪、磺胺氯吡嗪钠和球痢灵耐药后不会引起体内G6PD酶的变化。最后,在耐药性检测基础上,设置不同浓度的氯氟苄腺嘌呤(30mg/kg、60 mg/kg、90mg/kg)和磺胺氯吡嗪钠(600 mg/kg)进行疗效对比,以抗球虫指数(ACI)、病变记分、存活率、相对增重率以及卵囊产量来判定抗球虫效果,结果显示氯氟苄腺嘌呤90g/kgACI为187.19,属于高效抗球虫药物,对已经出现重度耐药的虫株仍有较好的抗球虫效果。
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全文目录
摘要 3-4 Abstract 4-10 文献综述 10-21 引言 21-23 1 材料与方法 23-31 1.1 实验材料 23-25 1.1.1 主要仪器 23 1.1.2 主要试剂 23-24 1.1.3 虫卵 24 1.1.4 实验动物 24 1.1.5 供试药物 24 1.1.6 制备电泳样品 24 1.1.7 配制试剂 24-25 1.2 实验方法 25-31 1.2.1 鸡球虫卵囊的分离与鉴定 25 1.2.2 单卵囊的分离与培养 25-27 1.2.3 耐药性检测 27-28 1.2.4 同工酶电泳 28-29 1.2.5 氯氟苄腺嘌呤与磺胺氯吡嗪钠疗效对比实验 29-31 2 结果与分析 31-40 2.1 单卵囊分离 31-32 2.1.1 单卵囊大小的测量 31-32 2.1.2 单卵囊感染后雏鸡球虫卵囊排出情况 32 2.2 柔嫩艾美艾球虫形态学鉴定 32-34 2.2.1 卵囊形态观察 32 2.2.2 卵囊大小测量结果 32-33 2.2.3 临床症状及寄生部位观察结果 33-34 2.3 耐药性检测结果 34-37 2.3.1 ACI 所得结果 34 2.3.2 POAA 所得结果 34-35 2.3.3 RLS 和ROP 所得结果 35-36 2.3.4 安庆株对4 种药物的敏感性结果 36 2.3.5 肥东株对4 种药物的敏感性结果 36-37 2.3.6 巢湖株对4 种药物的敏感性结果 37 2.4 同工酶电泳 37-39 2.4.1 LDH 同工酶电泳图 37-38 2.4.2 GPI 同工酶电泳图 38 2.4.3 G6PD 同工酶电泳图 38-39 2.5 氯氟苄腺嘌呤与磺胺氯吡嗪钠疗效对比实验 39-40 3 讨论 40-45 3.1 单卵囊分离技术的建立 40 3.2 鸡球虫形态学鉴定 40-41 3.3 耐药性检测 41 3.4 同工酶电泳 41-43 3.5 疗效对比实验 43-45 4 结论 45-46 参考文献 46-50 致谢 50-51 作者简介 51 在读期间发表的学术论文 51
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 各种家畜、家禽、野生动物的疾 > 家禽 > 鸡
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