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Gas6通过PI3K|Akt|FoxO3a通路在预适应中起心肌细胞保护作用

作　者: 徐晓
导　师: 刘承云
学　校: 华中科技大学
专　业: 老年医学
关键词: 心肌缺血 再灌注 预适应 Gas6 细胞凋亡 PI3K/Akt/FoxO3a
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 57次
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内容摘要


目的:初步探讨Gas6在预适应中对大鼠心肌细胞缺氧|复氧损伤的保护作用及机制。方法:选择心肌细胞株H9C2建立实验模型,实验分为5组:①正常对照组:正常培养H9C2细胞;②缺氧复氧组:缺氧2h,再复氧24h;③预适应组:先缺氧20min,再复氧45min,随后再缺氧2h,再复氧24h;④加外源性重组人生长停滞特异性蛋白6(rhGas6)组:加入终浓度为100ng/ml的rhGas6,余同缺氧复氧组;⑤Gas6+LY294002组:加入终浓度为100ng/ml的rhGas6和终浓度为10umol/L的PI3K通路阻断剂LY294002,余同缺氧复氧组。应用流式细胞术测细胞凋亡率,测LDH活性了解心肌细胞受损程度;real time -PCR法测Gas6mRNA表达;免疫印迹法测(Western blot)测定磷酸化Akt、FoxO3a蛋白的表达。结果:预适应组Gas6 mRNA表达高于缺氧复氧组(P〈0.05);与缺氧复氧组对比,预适应组和Gas6组LDH的活性及细胞凋亡率明显降低(P〈0.05), p-Akt和p-FoxO3a蛋白表达明显增高(P〈0.05);与Gas6组对比,Gas6+LY294002组LDH的活性及细胞凋亡率明显增加,p-Akt和p-FoxO3a蛋白表达明显减少(P〈0.05),而预适应组LDH的活性及细胞凋亡率和p-Akt、p-FoxO3蛋白表达无明显差异。结论:Gas6通过PI3K/Akt/FoxO3a信号通路在预适应中起心肌细胞保护作用。

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 病理学 > 病理生理学
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