学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株诱导凋亡和抗增殖作用的实验研究

作　者: 王永刚
导　师: 孙抒
学　校: 延边大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 蝙蝠葛活性成分 肺癌 细胞凋亡 ki-67抗原 Bcl-2蛋白 Caspase-3蛋白 Caspase-8蛋白 Caspase-9蛋白
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 39次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的:探讨蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株诱导凋亡和抗增殖作用及其机制,为开发抗肿瘤新中药提供实验依据。方法:应用MTT法测定蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株的生长抑制作用;通过倒置显微镜、光学显微镜、吖碇橙（AO）/溴化乙啶（EB）染色荧光显微镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学变化;采用流式细胞仪检测A549细胞的周期分布相和细胞凋亡率;应用免疫细胞化学技术检测药物处理前后增殖细胞核抗原Ki-67及凋亡相关蛋白酶Caspase3、8、9及凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达。结果:（1）MTT法检测结果,蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株有明显的抑制生长的作用,且呈现出浓度的依赖性:（2）倒置显微镜观察结果,实验组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱;（3）HE染色观察结果,实验组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质浓缩或染色质块形成,有的细胞膜起泡形成凋亡小体;（4）AO/EB荧光染色观察结果,实验组肿瘤细胞核染色质呈橘红色,胞质内的橘红色或橘黄色荧光消失,细胞周围可见亮绿色的凋亡小体;（5）流式细胞仪检测结果显示:蝙蝠葛活性成分可以诱导A549细胞发生凋亡,加药组出现亚二倍体峰,并且G0/G1期细胞比例显著增加（P＜0.01）,而S期和G2/M期细胞比例则明显下降,将细胞阻滞在G0/G1期;（6）免疫细胞化学ki-67抗原检测结果,蝙蝠葛活性成分作用后ki-67阳性表达率随药物浓度的提高和作用时间的延长而降低,表现出浓度的依赖性关系;凋亡相关基因表达检测结果,实验组Bcl-2基因蛋白阳性表达率明显降低,加药组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3表达增加,与对照组相比较均有显著差异（P＜0.01）。结论:1.蝙蝠葛活性成分在体外对人肺癌A549细胞株有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用。2.蝙蝠葛活性成分抑制增殖作用机制可能与下调ki-67蛋白表达,细胞周期发生G0/G1期阻滞有关。3.蝙蝠葛活性成分诱导凋亡作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达,上调Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表达,经由细胞凋亡的死亡受体和线粒体通路完成凋亡的启动和执行。4.蝙蝠葛活性成分具有显著的体外抗肿瘤作用,有望开发成一种新的抗肿瘤药物。

全文目录


缩略词表  6-7
中文摘要  7-9
英文摘要  9-11
第一章 前言  11-12
第二章 材料与方法  12-17
  2.1 材料  12-13
    2.1.1 肿瘤细胞株  12
    2.1.2 药物与试剂  12
    2.1.3 主要仪器  12-13
  2.2 方法  13-16
    2.2.1 细胞复苏与培养  13
    2.2.2 实验分组及药物处理  13
    2.2.3 MTT法体外细胞毒活性测定  13-14
    2.2.4 肿瘤细胞形态学观察  14
    2.2.5 免疫细胞化学染色  14-15
    2.2.6 流式细胞仪检测  15-16
  2.3 统计学处理  16-17
第三章 结果  17-20
  3.1 MTT法检测蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株增殖的影响  17
  3.2 形态学观察蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株的诱导凋亡作用  17-18
    3.2.1 倒置显微镜观察  17
    3.2.2 HE染色光镜观察  17
    3.2.3 AO/EB染色荧光显微镜观察  17-18
  3.3 流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期改变  18
  3.4 免疫细胞化学法检测蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株 的抗增殖作用  18-19
  3.5 免疫细胞化学法检测细胞凋亡相关基因蛋白表达  19-20
附图  20-25
第四章 讨论  25-30
第五章 结论  30-31
致谢  31-32
参考文献  32-34
综述  34-41
  参考文献  40-41

相似论文

  1. 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
  2. CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
  3. 125I粒子植入对晚期肺癌治疗效果的临床研究,R734.2
  4. 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
  5. 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子甘油醛-3-磷酸脱氢酶的影响,S858.31
  6. PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞钙信号的影响及其机理初探,S858.28
  7. β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
  8. 伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1联合诱导Vero细胞凋亡的研究,S856.9
  9. 黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导锦鲤原代肝细胞凋亡机制的初步研究,S856.9
  10. 沉默BMPR-IB基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡及BMP通路相关基因表达的影响,S828
  11. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
  12. Foxol对小鼠颗粒细胞凋亡的影响,S865.13
  13. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  14. 5-Aza-dC对肺癌SPC-A-1细胞p16、MGMT基因甲基化及其表达的影响,R734.2
  15. 肺癌患者癌组织和血浆p16基因甲基化的检测及去甲基化肺癌细胞生物学行为和p16基因转录的研究,R734.2
  16. 联合检测血清TPS，CEA，CYFRA21-1，NSE在肺癌诊断中的临床价值,R734.2
  17. 18氟—氟代脱氧葡萄糖诱导Eca-109食管癌细胞凋亡的初步研究,R735.1
  18. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导仓鼠肾细胞凋亡信号转导机制的研究,S856.9
  19. 超声弹性成像对乳腺肿块的诊断及预后判断价值,R445.1
  20. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导人结肠癌细胞凋亡线粒体信号转导机制的研究,R735.35
  21. 非小细胞肺癌组织中金属硫蛋白及基质金属蛋白酶-2的表达及相关性研究,R734.2

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com