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人Era结合蛋白及人era基因启动子的研究

作　者: 李云峰
导　师: 陈苏民；陈南春
学　校: 第四军医大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: A19蛋白人Era蛋白 GST pulldown 免疫共沉淀人era基因启动子
分类号: Q75
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 57次
引　用: 2次
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内容摘要

era基因是1986年测定大肠杆菌基因组序列时发现的1个开放读框。后来研究表明,其广泛分布于生物界。Era蛋白的N端是一个鸟苷酸结合蛋白结构域,属于G蛋白家族,其C端含有1个RNA结合功能结构域—KH结构域,这种独特的C端使Era蛋白有别于其他所有G蛋白而独立成为一个新的G蛋白亚家族。大肠杆菌的era属于rnc操纵元的1个细菌生存必需的基因,Era可特异地与16S的rRNA结合并参与细胞周期的调控。本研究工作分为两部分,1.对人Era候选结合蛋白A19进行了生物信息学分析和相互作用验证。2.对人era基因上游启动子进行了分析和验证。吴元明博士利用酵母双杂交技术筛选出可以和hEra结合的15种候选阳性的蛋白,其中以A19的阳性程度显著,为了探索era基因功能,对Era候选结合蛋白A19的理化性质和全长进行了生物信息学分析。a19的核酸序列定位于基因组19号染色体短臂13区3带。推测A19蛋白可能是一个可溶性的细胞外分泌蛋白,具有核输出信号,PFAM分析序列中

全文目录

缩略语表  7-9
中文摘要  9-12
英文摘要  12-14
前言  14-15
文献回顾  15-25
正文  25-73
  第一部分 hEra结合蛋白A19的验证  25-56
    引言  25-26
    实验一 A19的生物信息学分析  26-32
      1.1 材料和方法  26
        1.1.1 材料  26
        1.1.2 方法  26
      1.2 结果  26-31
      1.3 小结  31-32
    实验二 A19与hEra截短体的GSTpulldown验证  32-38
      2.1 材料和方法  32-35
        2.1.1 材料  32-33
        2.1.2 方法  33-35
      2.2 结果  35-37
      2.3 小结  37-38
    实验三抗A19蛋白抗体的制备  38-42
      3.1 材料和方法  38-40
        3.1.1 材料  38
        3.1.2 方法  38-40
      3.2 结果  40-41
      3.3 小结  41-42
    实验四 A19蛋白与hEra截短体的免疫共沉淀  42-49
      4.1 材料和方法  42-45
        4.1.1 材料  42-43
        4.1.2 方法  43-45
      4.2 结果  45-48
      4.3 小结  48-49
    第一部分讨论  49-56
  第二部分 era上游启动子序列的研究  56-73
    引言  56-57
    实验一 era上游序列的生物信息学分析  57-59
      1.1 材料和方法  57
        1.1.1 材料  57
        1.1.2 方法  57
      1.2 结果  57-58
      1.3 小结  58-59
    实验二 era基因上游序列的扩增  59-65
      2.1 材料和方法  59-61
        2.1.1 材料  59
        2.1.2 方法  59-61
      2.2 结果  61-64
      2.3 小结  64-65
    实验三 era启动子报告基因载体的构建及表达  65-71
      3.1 材料和方法  65-67
        3.1.1 材料  65
        3.1.2 方法  65-67
      3.2 结果  67-70
      3.3 小结  70-71
    第二部分讨论  71-73
全文总结  73-74
参考文献  74-79
附录  79-87
  A19基因及对应氨基酸序列  79
  era上游序列  79-81
  转录因子结合预测结果  81-87
个人简历  87-88
致谢  88

人Era结合蛋白及人era基因启动子的研究

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