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小麦镰刀菌毒素的检测及其毒素污染分析

作　者: 吴杰
导　师: 朱宝成；陈万权
学　校: 河北大学
专　业: 细胞生物学
关键词: ELISA 脱氧雪腐镰刀菌烯醇伏马毒素 T-2毒素玉米赤霉烯酮
分类号: S435.121
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

小麦赤霉病可由多种镰刀菌引起,主要致病种是禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum),是影响我国南方麦区、东北春麦区以及黄淮流域麦区的小麦生产的重要病害。镰刀菌引起小麦的穗腐,不仅使小麦产量和品质降低,而且在麦粒中存留有由镰刀菌代谢产生的真菌毒素,如脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)、伏马毒素(Fumonisin)、单端孢霉烯醇(T-2 toxin, T-2)和玉米赤霉烯酮(Zearalenone, ZON)等,危害人、畜健康。目前我国对真菌毒素相关研究较少,特别是对毒素的检测水平较低。本研究的目的便是通过对麦种中镰刀菌毒素的检测,明确镰刀菌毒素在我国各麦区小麦生产中污染与分布情况。实验选取以4种镰刀菌毒素的特异性抗体制备的ELISA试剂盒,检测了来自全国范围内的183个冬小麦、46个春小麦品种(系)样品中的镰刀菌毒素含量,并利用SAS6.12软件(SAS 2006)对不同麦区小麦样品中DON、Fumonisin、T-2和ZON 4种毒素含量进行单因子方差分析和邓肯式多重比较,对4种毒素污染率进行卡平方分析。结果表明,所有小麦品种(系)中镰刀菌毒素污染比较普遍,污染水平较低,均符合国家规定标准,其中,DON毒素平均含量相对较高(73.87μg/kg)。不同麦区毒素含量比较分析结果表明,DON毒素、Fumonisin毒素、T-2毒素在不同麦区间存在显著差异(P<0.01); ZON毒素在麦区间差异不显著(P>0.05);东北春麦晚熟组的DON毒素含量最高,并与其它各组之间存在显著差异。对4种毒素污染率进行卡平方分析结果显示,DON、ZON毒素在麦区间存在显著差异(P＜0.01); Fumonisin、T-2在麦区间差异不显著(P>0.05)；东北春麦晚熟组的DON、ZON毒素污染率最高。该结果与我国小麦赤霉病流行区域的分布基本相符,并深入分析了各麦区镰刀菌毒素的含量及分布状况,对赤霉病防控和小麦生产具有指导意义。由于我国小麦DON毒素的平均含量相对较高,因此,本研究还建立了单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱测定DON毒素含量的方法,基本程序包括样品通过水提取,提取液用免疫亲和柱净化,Symmetry C18色谱柱分离,紫外检测器检测和外标法定量。该方法对添加不同含量DON毒素的平均回收率为86.11%～95.24%,变异系数(CV)为0.88%～2.59%,检测低限为O.1mg/kg,可用于小麦样品中DON毒素的检测。

小麦镰刀菌毒素的检测及其毒素污染分析

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