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金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测及耐药性分析

作　者: 曹虹
导　师: 蒋云生；王敏
学　校: 中南大学
专　业: 内科学
关键词: 金黄色葡萄球菌肠毒素基因耐药性 PCR
分类号: R450
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 158次
引　用: 1次
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内容摘要

目的首先应用mecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),了解中南大学湘雅二医院MRSA的分布及耐药性。然后应用PCR检测临床分离的金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布情况,并对肠毒素基因的携带率及耐药性进行分析。方法1.根据MRSA的mecA基因编码序列设计一对PCR引物来特异性扩增靶基因片段,同时对中南大学湘雅二医院2006年8月—2008年5月临床分离随机留取的124株金黄色葡萄球菌进行MRSA鉴定。2.设计合成金黄色葡萄球菌肠毒素基因的引物,分别对124株金黄色葡萄球菌进行PCR鉴定和电泳检测,了解肠毒素基因的分布情况,并对主要的肠毒素基因进行耐药性分析。结果1.124株金黄色葡萄球菌中,mecA基因扩增阳性的有67株,鉴定为MRSA。对所挑的金黄色葡萄球菌菌珠进行耐药性分析发现,除青霉素,替考拉宁,万古霉素以外,MRSA对其余抗生素的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)(P＜0.05)。本次实验未发现替考拉宁,万古霉素耐药菌株。2.从临床分离株中检测到肠毒素SEA、SEB、SEC(1-3)、SED和SEF基因,但未检测出SEE基因。肠毒素基因总携带率为93.5%(116/124),其中SEA、SEB、SEC、SED和SEF的检出率分别为90.5%、6.9%、61.3%、5.2%和25.9%。MRSA的肠毒素基因携带率为100%,MSSA肠毒素基因携带率为83.5%,两者比较无明显差异(p＞0.05)。同时检出2种及2种以上的肠毒素基因的菌株有76株(66.4%),以携带SEA+SEC、SEA+SEF和SEA+SEC+SEF基因为主,检出率分别为33.6%,7.8%,13.8%。3.SEF基因在MRSA中检出率为34.3%,在MSSA中检出率为14.3%,两者之间有显著性差异(P＜0.05)。4.对携带SEA、SEC、SEF基因的菌株分别进行耐药率分析发现3者在耐药率上无显著性差异(P＞0.05)。5.对单独携带SEA,携带SEA+SEC,SEA+SEF,SEA+SEC+SEF基因的菌株进行耐药性分析,各基因型除对替考拉宁,万古霉素敏感外,对其他抗生素均具有不同程度的耐药,耐药率为20%-100%,其中携带SEA+SEF,SEA+SEC+SEF肠毒素基因的菌株在耐药率上高于单独携带SEA基因的菌株。6.对复方新诺明的耐药分析发现,携带SEA+SEC+SEF的菌株的耐药率为75.0%,高于单独携带SEA(28.6%)、SEA+SEC(38.7%)的耐药率,具有统计学差异(P＜0.05)。携带SEA+SEC+SEF、SEA+SEF、SEA的菌株对阿米卡星耐药率分别为75.0%、77.0%和21.5%,前两者与携带SEA的菌株相比有显著差异(P＜0.05)。结论1.用PCR技术检测金黄色葡萄球菌mecA基因及肠毒素基因,具有特异性强,灵敏度高,速度快,易操作的特点。2.中南大学湘雅二医院临床分离株MRSA耐药率高,且具有多重耐药性。3.MRSA的肠毒素基因携带率与MSSA的肠毒素基因携带率相比无明显差异。4.中南大学湘雅二医院临床分离株金黄色葡萄球菌以携带SEA、SEC、SEF基因为主,其中MRSA中SEF基因携带率与MSSA中SEF携带率相比存显著性差异。5.携带SEA、SEC、SEF 3种不同肠毒素基因类型的菌株与其耐药性无明显关系。6.携带多种肠毒素基因的菌株在耐药率上高于只携带一种肠毒素基因的菌株。

全文目录

中文摘要  4-7
英文摘要  7-12
中英文缩略词表  12-13
第一章前言  13-15
第二章材料和方法  15-19
  1.材料  15
  2.方法  15-19
第三章结果  19-30
第四章讨论  30-37
第五章结论  37-38
参考文献  38-42
综述金黄色葡萄球菌及肠毒素的研究  42-51
  参考文献  48-51
附图  51-61
致谢  61-62
攻读学位期限间成果  62

金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测及耐药性分析

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