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TGF-β1、Smad4在宫颈鳞状细胞癌中的表达和熊果酸对SiHa细胞的作用

作　者: 杜秀銮
导　师: 王修珍；顾振纶；周文轩；郭次仪
学　校: 苏州大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 宫颈鳞状细胞癌转化生长因子-β1 Smad4 UA SiHa细胞凋亡
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 84次
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内容摘要

第一部分目的探讨TGF-β1、Smad4蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其与临床病理的关系。方法采用免疫组化S-P法检测TGF-β1、Smad4蛋白在89例宫颈鳞癌组织和19例正常宫颈组织中的表达,分析它们的表达情况与患者临床病理的关系,以及TGF-β1和Smad4蛋白表达的相关性。结果TGF-β1蛋白在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率为71.9%,与正常宫颈组织的阳性表达率(31.1%)有显著差异(P<0.01),且表达强度与病理分级和浸润深度相关(P<0.05),与宫颈鳞癌的临床分期、淋巴结转移及患者年龄无关(P>0.05)。Smad4蛋白在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率为32.6%,与正常宫颈组织的阳性表达率(100%)有显著差异(P<0.01),且表达强度与病理分级有关(P<0.05),与临床分期、浸润深度、淋巴结转移、年龄均无关(P>0.05)。TGF-β1和Smad4蛋白的表达无相关性(r=0.11, P>0.05)。结论TGF-β1和Smad4蛋白的表达均与宫颈鳞癌的病理分级相关,有望作为判断宫颈鳞癌恶性程度的指标,TGF-β1在宫颈鳞癌生长、浸润过程中发挥一定作用。第二部分目的观察熊果酸(ursolic acid, UA)对人宫颈鳞癌SiHa细胞的抑制作用并探讨其作用机制。方法四氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法观察UA对SiHa细胞增殖的影响;Wright-Giemasa染色、Hoechst33258荧光染色和透射电镜观察凋亡细胞形态变化;流式细胞仪检测SiHa细胞周期和细胞凋亡率的变化;RT-PCR检测SiHa细胞TGF-β1 mRNA和Smad4 mRNA表达的变化。结果UA明显抑制宫颈鳞癌SiHa细胞的生长,并呈时间和浓度依赖趋势;Hoechst33258荧光染色可见胞核染色质不均,呈颗粒状荧光,透射电镜可见胞质浓缩,核染色质凝聚致密,附着在核膜下等典型的凋亡细胞核形态变化;流式细胞仪检测显示UA作用后细胞周期阻滞在G0/G1期,并见到细胞凋亡峰;RT-PCR检测显示TGF-β1mRNA的表达减少,并呈时间依赖趋势,Smad4 mRNA表达随时间延长而增加。结论UA对人宫颈鳞癌SiHa细胞具有抑制增殖和诱导细胞凋亡的作用,并使SiHa细胞周期阻滞于G0/G1期。其机制可能与UA上调Smad4基因表达,恢复TGF-β/Smads信号传导通路有关。

全文目录

中文摘要  3-5
Abstract  5-8
研究背景  8-12
第一部分 TGF-β1 和Smad4 在宫颈鳞状细胞癌中的表达及与临床病理的关系  12-20
  材料和方法  12-14
  结果  14-18
  附图  18-19
  小结  19-20
第二部分 UA 对人宫颈鳞癌SiHa 细胞的作用机制  20-34
  材料与方法  20-26
  结果  26-33
  小结  33-34
讨论  34-39
结论  39-40
参考文献  40-46
综述 TGF-β/Smads 信号传导通路与宫颈癌  46-54
攻读硕士学位期间发表及待投稿的论文  54-55
英文缩略词表  55-56
致谢  56

TGF-β1、Smad4在宫颈鳞状细胞癌中的表达和熊果酸对SiHa细胞的作用

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