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维药异常黑胆质成熟剂总酚对宫颈癌SiHa细胞株体外生长的影响

作 者: 陈珂瑶
导 师: 古扎丽努尔·阿不力孜
学 校: 新疆医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 异常黑胆质成熟剂总酚 SiHa细胞 细胞凋亡 FHIT Survivin
分类号: R29
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 31次
引 用: 1次
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内容摘要


目的:研究维药异常黑胆质成熟剂总酚对体外宫颈癌SiHa细胞株增殖的作用及作用机理,从而理论上提出异常黑胆质成熟剂总酚用于宫颈癌患者治疗的可行性。方法:1)用不同浓度的异常黑胆质成熟剂总酚作用于人宫颈癌SiHa细胞,于作用后24h,48h,72h,96h,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,MTT比色法测定各组细胞的抑制率和半数抑制浓度(IC50);2)流式细胞术检测不同浓度的异常黑胆质成熟剂总酚作用于人宫颈癌SiHa细胞后48h的细胞凋亡率的变化,以及Bcl-2和端粒酶的表达情况;3)用实时荧光定量RT-PCR方法检测不同浓度的异常黑胆质成熟剂总酚作用于人宫颈癌SiHa细胞48小时后FHITSurvivin基因的表达情况。结果:1)在75-175μg/ml浓度区间,异常黑胆质成熟剂总酚埘SiHa细胞的增殖有明显的抑制作用,并且随着药物浓度的增加和作用时间的延长,细胞的抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.01);2)SiHa细胞经异常黑胆质成熟剂总酚作用后均出现明显的凋亡特征,且随着药物浓度增高,作用时间的延长,细胞形态学变化更明显;3)流式细胞仪分析结果显示随着异常黑胆质成熟剂总酚浓度的增加,SiHa细胞的凋亡率升高,Bcl-2及端粒酶的表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);4)实时荧光定量RT-PCR结果显示异常黑胆质成熟剂总酚后,SiHa细胞中FHIT表达增强,Survivin表达减弱(P<0.05)。结论:1)异常黑胆质成熟剂总酚能抑制宫颈癌SiHa细胞体外生长,并呈明显的量效关系和时效关系;2)异常黑胆质成熟剂总酚能通过抑制癌基因Bcl-2,端粒酶及Survivin的表达,促进FHIT基因的表达来诱导SiHa细胞凋亡

全文目录


摘要  7-8
Abstract  8-9
前言  9-11
材料与方法  11-22
  1. 材料与仪器  11-14
    1.1 细胞株  11
    1.2 药品  11
    1.3 主要试剂  11-12
    1.4 主要材料和仪器  12-13
    1.5 实验主要液体的配制  13-14
  2. 实验方法  14-22
    2.1 细胞培养  14-15
    2.2 细胞增殖抑制实验(MTT法)  15
    2.3 细胞形态学改变  15
    2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡率  15
    2.5 流式细胞仪检测Bcl-2及端粒酶的表达  15-16
    2.6 实时荧光定量RT-PCR检测FHITSurvivin的表达  16-20
    2.7 实验数据处理  20
    2.8 统计学处理  20
    2.9 技术路线图  20-22
结果  22-27
讨论  27-35
小结  35-36
致谢  36-37
参考文献  37-41
附录  41-44
综述  44-52
  参考文献  49-52
攻读硕士学位期间发表的学位论文  52-53
导师评阅表  53

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中国少数民族医学
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