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S100A13基因高表达对甲状腺癌TT细胞生长特性的影响

作　者: 徐雪辉
导　师: 曹仁贤
学　校: 南华大学
专　业: 内科学
关键词: S100A13基因甲状腺癌 TT细胞基因转染细胞生长
分类号: R736.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 22次
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内容摘要

目的:建立稳定高表达S100A13基因的甲状腺癌 TT细胞系,观察转染S100A13基因后甲状腺癌TT细胞的生长情况,研究S100A13基因高表达对甲状腺癌TT细胞生长增殖的影响,探讨S100A13基因在甲状腺癌发生中的作用。方法:应用Lipofectamine 2000将真核表达载体pcDNA3.2/V5/GW/D-S100A13和空载体pcDNA3.2/ V5/GW/D导入甲状腺癌TT细胞系,经G418抗性筛选得到稳定的克隆并扩大培养成系。采用实时荧光定量RT-PCR和Western Blotting鉴定表达S100A13的TT细胞系,观察转染后TT细胞的生长情况并以相差显微镜照相,应用细胞生长曲线法、MTT比色法、流式细胞术研究高表达S100A13基因对TT细胞生长速率和细胞周期的影响。结果:成功建立了稳定高表达S100A13基因的甲状腺癌TT细胞系;转染后TT-V5-S100A13组细胞生长明显增快;分别将1×104个TT-V5-S100A13、TT-V5和TT细胞培养7天后,各组细胞数目分别为(2.01±0.05)×105、(0.89±0.04)×105和(0.81±0.03)×105 (P<0.001);MTT比色法示TT-V5-S100A13、TT-V5和TT细胞培养9天后相对增殖率分别为(92.11±0.51)%(、44.09±0.75)%(、45.01±0.65)% (P<0.001)。TT-V5-S100A13、TT-V5和TT经流式细胞仪检测S期的细胞比例分别为9.12±0.32%、6.22±0.12%和6.18±0.13%(P<0.001),G2/M期的细胞比例分别为26.95±0.58%、11.33±0.39%和12.01±0.26%(P<0.001)。结论:成功建立了带V5小片段的pcDNA3.2载体的稳定高表达S100A13基因的TT细胞系TT-V5-S100A13;稳定高表达S100A13基因对TT细胞的生长有促进作用,能够促进TT细胞周期从G0/G1期向S期及G2/M期过渡。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
论文正文  7-28
  前言  7-8
  实验材料  8-11
  实验方法  11-17
  结果  17-23
  讨论  23-27
  实验结论  27-28
参考文献  28-32
主要缩略语及英文索引  32-33
综述  33-41
成果  41-42
致谢  42

S100A13基因高表达对甲状腺癌TT细胞生长特性的影响

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