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SOCS3基因转染延长同种异体小鼠心脏移植物生存时间及其机制

作　者: 胥琴
导　师: 方敏；龚非力
学　校: 华中科技大学
专　业: 免疫学
关键词: SOCS3 基因转染同种异体心脏移植
分类号: R654.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:应用小鼠同种异体心脏移植模型研究SOCS3(Suppressor of cytokine signaling 3)对移植心脏的存活时间,炎性细胞的浸润情况,以及体内T细胞亚群分化的影响。方法:实验以BALB/C(H-2d)为供者,C57BL/6J(H-2b)为受者,进行小鼠同种异体心脏移植,共分三组即SOCS3组、PBS组和空载体组,每组8对。术前3天,各组每天分别将100μg真核表达质粒pEF-FLAG-I/mSOCS3、300μlPBS和100μg空载质粒经尾静脉注射供者和受者,术后继续连续三天注射受者。观察各组4只受者移植心脏的存活时间,绘制生存时间曲线。各组其余4只受者在术后不同时间点用HE染色检法观察不同移植心脏的病理改变,免疫组织化学法检测移植心脏CD3、F4/80、Gr1、SOCS3、STAT3和pSTAT3的表达情况,并用流式细胞术检测脾细胞中T细胞亚群的比例变化。结果:①小鼠经尾静脉注射真核表达质粒pEF-FLAG-I/mSOCS3后免疫组织化学法检测心脏能有效表达SOCS3。②PBS组、空载体组和SOCS3组移植心脏的平均生存时间及标准差分别为7.5±0.58天、7.75±0.5天和12.5±0.58天,统计学分析,SOCS3能延长移植心脏的生存时间(P <0.01)。③与PBS组和空载体组比较,SOCS3处理组术后第4天移植心脏中T淋巴细胞和巨噬细胞的浸润明显减少,同时STAT3和pSTAT3的表达下调;术后第2天和第4天脾脏CD4+IL17+细胞和CD8+IL17+细胞数量减少(P <0.05),而CD4+细胞、CD4+ IFNγ+细胞、CD8+细胞和CD8+ IFNγ+细胞无明显变化(P >0.05)。结论:真核表达质粒pEF-FLAG-I/mSOCS3能在小鼠心脏组织中有效表达SOCS3, SOCS3可通过抑制STAT3磷酸化而阻断STAT3信号通路等机制,抑制CD4+IL-17+细胞和CD8+IL-17+细胞的分化,同时减少移植心脏T淋巴细胞和巨噬细胞浸润,从而延长移植心脏的生存时间。

全文目录

一、英文缩略词表  5-6
二、中文摘要  6-8
三、英文摘要  8-10
四、前言  10-12
五、第一部分  12-24
  引言  12
  材料和方法  12-20
  实验结果  20-23
  小结  23-24
六、第二部分  24-36
  引言  24
  材料和方法  24-30
  实验结果  30-35
  小结  35-36
七、讨论  36-38
八、结论  38-39
九、参考文献  39-41
十、综述  41-52
  参考文献  46-52
十一、致谢  52

SOCS3基因转染延长同种异体小鼠心脏移植物生存时间及其机制

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