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高效液相色谱法测定大豆异黄酮的方法研究

作　者: 谷岩
导　师: 王林山；刘渭萍
学　校: 东北大学
专　业: 化学工程
关键词: HPLC 异黄酮大豆苷黄豆黄苷染料木苷大豆苷元黄豆黄素
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

异黄酮是黄酮类化合物中的一种,主要存在于豆科植物中,大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次级代谢产物。由于是从植物中提取,与雌激素有相似结构,因此称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性,是天然的癌症化学预防剂。益生大豆异黄酮是从非转基因大豆精制而成的生物活性物质,是一种具有多种重要生理活性的天然营养因子,是纯天然的植物雌激素,容易被人体吸收,能迅速补充营养。本研究建立了高效液相色谱法（HPLC）同时测定大豆异黄酮五种组分大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷、黄豆黄素的测定方法。实验考察了不同流动相体系、流动相配比、柱温、流速、进样量等因素对分离的影响,确定了最佳色谱条件:ZORBAXSB-C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;二极管阵列检测器,检测波长为255 nm;色谱柱温度20℃,流速:1.0 mL/min,进样体积:5μL。在最佳色谱条件下,建立了各物质的标准曲线,相关系数r为0.9996～0.9999;样品的加标回收率均在83.0～100.6%,方法相对标准偏差在3.0%以内,实现了30 min内对5种化合物的同时测定。研究结果表明,本实验所建立的测定大豆异黄酮五种组分大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素的高效液相色谱法,具有操作简单,快速、准确、重现性好、检出限低的特点。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
目录  7-9
第1章绪论  9-23
  1.1 前言  9
  1.2 大豆异黄酮的结构、组成与性能  9-14
    1.2.1 大豆异黄酮的结构与组成  9-13
    1.2.2 大豆异黄酮的性能  13-14
  1.3 大豆异黄酮的分布与医学价值  14-17
    1.3.1 大豆异黄酮的自然分布  14-15
    1.3.2 大豆异黄酮的医学价值  15-17
  1.4 大豆异黄酮的提取技术  17-19
  1.5 国内外大豆异黄酮分析方法的研究进展  19-20
  1.6 选题的目的及意义  20-23
第2章方法原理  23-27
  2.1 引言  23
  2.2 反相键合液相色谱法分离机理  23-24
  2.3 定性和定量依据  24-25
    2.3.1 定性分析依据  24-25
    2.3.2 定量分析依据  25
  2.4 样品预处理方法  25-27
第3章实验部分  27-29
  3.1 仪器和试剂  27
    3.1.1 所用仪器  27
    3.1.2 试剂与标准品  27
  3.2 色谱条件  27-28
  3.3 实验方法  28-29
    3.3.1 样品预处理  28
    3.3.2 仪器操作  28-29
第4章结果与讨论  29-51
  4.1 色谱柱及其操作参数的选择  29
  4.2 流动相体系的选择  29-30
  4.3 DAD检测波长的确定  30-33
  4.4 梯度洗脱方式及洗脱程序的确定  33-37
  4.5 柱温的选择  37
  4.6 进样量的选择  37-38
  4.7 最佳色谱条件  38-39
  4.8 标准曲线  39-41
  4.9 仪器精密度实验  41-42
  4.10 检出限和定量限  42-43
  4.11 样品前处理方法的确定  43-44
  4.12 回收率实验  44-51
第5章结论  51-53
参考文献  53-59
致谢  59-61
已发表论文  61

高效液相色谱法测定大豆异黄酮的方法研究

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