|
目的观察罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾脏脂联素受体1(adiponectin receptor 1, AdipoR1)表达的影响,探讨罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制。方法36只6周龄清洁级雄性Wistar大鼠随机分为A组(正常对照组,n=10)、B组(糖尿病组,n=13)和C组(糖尿病罗格列酮治疗组,n=13)。A组喂以常规饲料,B组和C组喂以高糖高脂饲料(67%常规饲料,20%蔗糖,10%熟猪油,2%胆固醇,1%胆酸钠)。4周后B组和C组腹腔注射链脲佐菌素30mg／kg,破坏部分胰岛细胞,A组腹腔注射等体积枸橼酸缓冲液。1周后测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素水平(FINS)并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),以FBG>7.8mmol/L且伴胰岛素抵抗者为造模成功。其中B组成模11只,C组成模12只。C组每天给予罗格列酮3mg／kg灌胃,A组和B组给予同体积生理盐水灌胃。12周后,于处死动物前1天用代谢笼留取尿标本,测24h尿白蛋白排泄率；动物禁食12h后,用10%水合氯醛(0.6g／kg体重)腹腔注射麻醉大鼠,腹主动脉采血留取血标本,用于检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)。动物处死后迅速取出肾脏,用生理盐水冲洗干净后滤纸吸干水分称重,计算肾脏指数(肾脏重量／体重),分离肾皮质,一部分用中性福尔马林固定,脱水,石蜡包埋,常规切片,用于制作病理切片及免疫组化；其余部分迅速投入液氮中,冻透后储存于-70℃冰箱中,用于RT-PCR法测定肾脏AdipoR1 mRNA表达。免疫组化法观察肾组织中AdipoR1、MCP-1、TGF-β1的表达变化。结果与A组比较,B组糖尿病大鼠血糖、血脂、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率、肾脏指数均显著升高(P<0.05),罗格列酮干预后,C组上述指标均较B组显著降低(P<0.05)。B组糖尿病组大鼠肾组织AdipoR1 mRNA表达显著低于A组(P<0.01),罗格列酮干预后,C组大鼠AdipoR1 mRNA表达较B组显著升高(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,B组糖尿病大鼠肾脏AdipoR1表达较A组显著降低(P<0.01),MCP-1、TGF-β1较A组显著升高(P<0.01)。经罗格列酮干预后,C组大鼠肾脏AdipoR1表达较B组显著升高(P<0.01),而MCP-1、TGF-β1较A组显著降低(P<0.01)。结论1.2型糖尿病大鼠肾组织AdipoRl表达显著降低,血糖、血脂、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率、肾脏指数显著升高。肾组织中MCP-1、TGF-β1表达显著升高。2.在经罗格列酮治疗后,2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱明显改善,胰岛素敏感性增加。肾组织AdipoR1表达升高,MCP-1、TGF-β1表达降低。罗格列酮通过改善糖脂代谢,上调肾脏AdipoR1表达,降低MCP-1、TGF-β1表达,减轻肾脏肥大,产生肾脏保护作用。
|