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三羟异黄酮调控miR-223、miR-27a抑制人胰腺癌细胞进展的机制研究

作　者: 程龙
导　师: 夏俊
学　校:
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 胰腺癌三羟异黄酮 miR-223 miR-27a Fbw7 FOXO1 细胞增殖凋亡迁移侵袭
分类号: R735.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

背景与目的：胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤，五年生存率不到6%。吉西他滨是治疗晚期胰腺癌最有效的药物之一，虽然吉西他滨单用或者联合其它化疗药物治疗胰腺癌已经被视为常规方案，但是由于副作用和化疗耐药的出现，总体上仍然未能明显提高患者生存率。因此，寻找新的、更有效的治疗胰腺癌的方法意义重大。本课题研究目的：（1）探讨三羟异黄酮对人腺癌细胞PANC-1、BxPC-3、AsPC-1增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。（2）探讨三羟异黄酮是否通过下调miR-223表达影响胰腺癌细胞生长、凋亡、迁移和侵袭。（3）探讨三羟异黄酮是否通过下调miR-27a表达影响胰腺癌细胞生长、凋亡、迁移和侵袭，进而发挥其抗肿瘤作用。方法：（1）以人腺癌细胞PANC-1、BxPC-3、AsPC-1为研究对象，采用噻唑蓝比色法、流式细胞术、创伤愈合实验和Transwell方法检测三羟异黄酮对人腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。（2）采用实时荧光定量PCR检测三羟异黄酮对人胰腺癌细胞miR-223、miR-27a表达的影响。（3）通过脂质体瞬时转染miRNAinhibitor分别下调胰腺癌细胞miR-223与miR-27a，研究相应的miRNA在胰腺癌细胞中的作用机制。蛋白质印迹实验检测Fbw7和FOXO1蛋白表达。结果：1.三羟异黄酮能够抑制细胞增殖并呈剂量依赖关系；三羟异黄酮能够促进胰腺癌细胞凋亡；三羟异黄酮能够抑制胰腺癌细胞迁移和侵袭能力。2.三羟异黄酮下调了胰腺癌细胞miR-223表达；三羟异黄酮通过下调miR-223抑制了胰腺癌细胞的增殖、侵袭能力，促进肿瘤细胞凋亡。三羟异黄酮通过下调miR-223上调了AsPC-1细胞中Fbw7蛋白表达。3.三羟异黄酮下调了胰腺癌细胞miR-27a表达；三羟异黄酮通过下调miR-27a抑制了胰腺癌细胞的增殖、侵袭能力，促进肿瘤细胞凋亡。三羟异黄酮通过下调miR-27a上调了PANC-1细胞中FOXO1蛋白表达。结论：1.三羟异黄酮能够抑制胰腺癌细胞PANC-1、BxPC-3、AsPC-1增殖、迁移和侵袭能力，促进细胞凋亡。2.三羟异黄酮能够部分地通过下调AsPC-1细胞中miR-223的表达进而上调靶蛋白Fbw7的表达，从而抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭，促进细胞凋亡。3.三羟异黄酮能够部分地通过下调PANC-1细胞中miR-27a的表达进而上调靶蛋白FOXO1的表达，从而抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭，促进细胞凋亡。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-12
材料与仪器  12-15
实验方法  15-25
实验结果  25-32
讨论  32-36
结论  36-37
参考文献  37-42
致谢  42-43
附录 A 主要英文缩略词简表  43-44
附录 B 个人简介  44
附录 C 已发表论文  44-45
附录 D 综述  45-57
  参考文献  51-57

三羟异黄酮调控miR-223、miR-27a抑制人胰腺癌细胞进展的机制研究

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