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腺相关病毒介导hBMP-2体内转染对兔退变椎间盘髓核细胞凋亡的影响

作　者: 林然
导　师: 叶君健
学　校: 福建医科大学
专　业: 外科学
关键词: 椎间盘退变细胞凋亡纤维环刺伤法基因 Fas Caspase 兔
分类号: R681.53
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 27次
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内容摘要

【目的】:探讨纤维环刺伤法诱导兔腰椎间盘退变建立动物模型后,应用腺相关病毒(Adeo-associated virus,AAV)介导人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)基因体内转染兔的退变椎间盘,观察AAV-HBMP-2转染对退变椎间盘Fas与Caspase-3凋亡基因的影响。【方法】:36只普通级雄性新西兰大白兔(重量约3.0kg,1岁龄),手术取右侧腹膜后入路,用16号皮肤穿刺针于L2/3、L3/4、L4/5椎间盘纤维环右前外侧刺入,深度为5mm,造模4周后注入AAV-hBMP-2,分别于注射后2、4、8周对造模的椎间盘(L2/3、L3/4、L4/5)及正常椎间盘(L5/6)进行磁共振(MRI)检查,动物处死取材后采用原位DNA片断末端标记(TUNEL)和免疫组织化学方法观察。【结果】:①免疫组化观察到Fas与Caspase-3蛋白各周注射AAV-hBMP-2组与注射AAV组、注射生理盐水组两两比较均有显著差异(P<0.01),而注射AAV组与注射生理盐水组组间比较无明显差别(P>0.05);②TUNEL法测凋亡细胞观察到各周注射AAV-hBMP-2组与注射AAV组、注射生理盐水组两两比较均有显著差异(P<0.01),而注射AAV组与注射生理盐水组组间比较无明显差别(P>0.05);③注射AAV-hBMP-2组在注射术后2,4及8周改良Thompson分级比较无明显统计学意义(P﹥0.05),注射AAV组与注射生理盐水组改良Thompson分级比较有明显的统计学意义(P均<0.05)。注射AAV-hBMP-2组髓核信号与注射AAV组、注射生理盐水组的椎间盘改良Thompson分级比较有明显的统计学意义(P均<0.05),而注射AAV组与注射生理盐水组比较无明显差别(P>0.05)。【结论】:体内转染AAV-hBMP-2能抑制椎间盘Fas、Caspase-3蛋白的表达,抑制细胞凋亡,延缓椎间盘的退变。

全文目录

英文缩写词表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-11
材料与方法  11-18
结果  18-29
讨论  29-34
结论  34
参考文献  34-38
已撰写的论文  38-39
致谢  39-40
综述  40-48

腺相关病毒介导hBMP-2体内转染对兔退变椎间盘髓核细胞凋亡的影响

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