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新疆加工番茄顶端黄化病因分析及马铃薯M病毒的鉴定

作　者: 崔燕华
导　师: 向本春
学　校: 石河子大学
专　业: 植物病理学
关键词: 加工番茄顶端黄化病电感耦合等离子发射光谱法 ELISA 分子鉴定马铃薯M病毒
分类号: S436.412
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

2009-2010年间对新疆石河子、玛纳斯县、呼图壁县、吉木萨尔县、和硕县等15个加工番茄主产区进行了深入调查,发现田间番茄除了表现花叶、蕨叶等常见病毒病症状外,还有一些植株表现为顶端全部黄化,而中下部叶片表现正常,与普通黄化症状不一致,田间呈随机分布状,发病率在2%-50%之间,不同地区的发病率和发病程度有一定差异。发病率与品种、栽培方式以及灌水方式没有明显的关系。通过ICP-AES法对加工番茄顶端黄化样品9种元素含量进行测定,结果显示：顶端黄化植株中Mg、Mn元素的含量稍微低于正常植株,而B、K、Mo、Na、Zn的含量则明显高于同一地块的正常植株,Fe、Ca元素的含量在黄化植株中和正常植株中则没有明显差异。基本明确了加工番茄顶端黄化并非由生理性缺素引起。通过对田间样品病毒粒子粗提液的电镜观察,发现有多种病毒粒子存在。间接酶联免疫吸附法对30个田间样品进行检测的结果表明CMV的检测率为100%,TMV、ToMV、BBWV的检测率分别为66.7%、96.7%、70.0%。运用TMV、ToMV、CMV、PVS、PVM等特异性引物对加工番茄顶端黄化样品进行RT-PCR扩增,得到了相应的目标条带,这与ELISA检测结果基本一致,加工番茄顶端黄化样品中有多种病毒存在。初步认为加工番茄顶端黄化可能与这些病毒有一定关系,但病因仍不清楚。将PVM特异性引物PVMR/F扩增出的目标片段进行克隆并测序,经过与GENEBANK中其他已报道的PVM部分序列比对,结果显示：RT-PCR扩增出的目标条带是PVM的一段基因,有1198个核苷酸组成,包含完整的PVMCP基因(记为PVM-XJ)。与基因库中的其他代表分离物相比,核苷酸序列与中国杭州(AJ437481)、美国(AF023877)、波兰(AY311394)、伊朗(EF397743)、拉脱维亚(GQ496609)、俄国(NC001361)、德国(X57440)、意大利(X85114)以及加拿大(EF063383、EF063384、EF063387)地区分离物的同源性为74.0%-95.8%。PVM-XJ与俄国的登录号为NC001361的亲缘关系最近,与加拿大的EF063387关系最远。首次在加工番茄上用分子检测方法鉴定到了PVM。

新疆加工番茄顶端黄化病因分析及马铃薯M病毒的鉴定

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