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卡维地洛抑制肝星状细胞的激活及机理探讨

作　者: 梁春丽
导　师: 樊晓明
学　校: 复旦大学
专　业: 消化内科学
关键词: 肾上腺素能β2受体卡维地洛肝星状细胞T6细胞株增殖凋亡转化生长因子β1
分类号: R575.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的探讨卡维地洛对大鼠肝星状细胞激活和增生的作用及可能的作用机理。方法第一部分1.将细胞传代培养后分为五组。空白对照组；模拟对照组；低剂量药物处理组(卡维地洛5μmol/1)；中剂量药物处理组(卡维地洛10μmol/1)；高剂量药物处理组(卡维地洛20μmol/1).2.通过CCK-8检测细胞增殖抑制率。3.通过流式细胞仪测定比较各组细胞的凋亡率。4.将肝星状细胞传代培养后分六组。空白对照组；血小板衍化生长因子组(PDGF-BB 10ng/ml)；模拟对照组(PDGF-BB 10ng/ml)；低剂量药物处理组(PDGF-BB 10ng/ml+卡维地洛5μmol/1)；中剂量药物处理组(PDGF-BB 10ng/ml+卡维地洛10μmol/1)；高剂量药物处理组(PDGF-BB 10ng/ml+卡维地洛20μmol/1).药物处理组需加CVD预处理30分钟后,再加PDGF-BB.5.通过Western-blot观察α-平滑肌肌动蛋白表达水平的变化。第二部分1.通过RT-PCR及Western-blot检测TGF-β1表达水平在各组中的变化。2.细胞传代培养后分为四组：空白对照组(DMEM):模拟对照组；肾上腺素β2受体激动剂组(salbutamol 10μmol/1)；肾上腺素p2受体激动剂和阻滞剂组(salbutamol 10μmol/1+ICI-118551 10μmol/1).第四组以ICI-118551预处理30分钟后,再加入salbutamol。3.通过流式细胞仪测定各组细胞的凋亡率。4.通过Western-blot检测凋亡相关蛋白bcl-2、bax表达水平在各组中的变化。结果第一部分1.卡维地洛呈浓度及时间依赖性的抑制了肝星状细胞的增殖。2.卡维地洛促进了肝星状细胞的凋亡。3.卡维地洛降低了PDGF介导的肝星状细胞α平滑肌肌动蛋白表达水平。第二部分1.卡维地洛降低了转化生长因子β1水平的表达。2.肾上腺素p2受体激动剂salbutamol可以抑制肝星状细胞的凋亡,这一作用可以被肾上腺素p2受体拮抗剂ICI-118551所阻断。3.卡维地洛和肾上腺素β2受体激动剂及拮抗剂对凋亡相关蛋白bcl-2、bax表达水平无明显影响。结论1.卡维地洛能够抑制肝星状细胞的活化及增殖,促进肝星状细胞的凋亡。2.其作用可能通过影响TGF-β1的表达以及阻断肾上腺素β2受体介导。

全文目录

英文缩写词表  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-9
引言  9-13
第一部分卡维地洛抑制肝星状细胞激活  13-26
  前言  13
  材料与方法  13-20
    一、细胞  13
    二、试剂与材料  13-15
    三、实验仪器  15-16
    四、实验方法  16-20
  结果  20-24
  讨论  24-25
  小结  25-26
第二部分卡维地洛抑制肝星状细胞活化的机理  26-39
  前言  26-27
  材料和方法  27-30
    一、细胞  27
    二、试剂与材料  27
    三、实验仪器  27-28
    四、实验方法  28-30
  结果  30-37
  讨论  37-38
  小结  38-39
结论  39-40
参考文献  40-43
综述  43-51
  参考文献  49-51
攻读硕士学位期间发表文章  51-52
致谢  52-53

卡维地洛抑制肝星状细胞的激活及机理探讨

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