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X线对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞周期和细胞凋亡的影响

作　者: 季红
导　师: 孙丰源
学　校: 天津医科大学
专　业: 眼科学
关键词: 弥漫大B细胞淋巴瘤 放射治疗 细胞周期 细胞凋亡
分类号: R733.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：选取与眼眶弥漫大B细胞淋巴瘤生物学特性较为相似的弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞系作为实验对象,观察不同放射剂量和不同作用时间对DLBCL细胞生长的影响及其细胞周期和细胞凋亡的变化,从而初步探讨X射线对DLBCL细胞的作用,进而为其放射治疗提供理论依据。方法：1、DLBCL细胞复苏,观察细胞形态,了解生长情况和特性。2、用0 Gy,2 Gy,4 Gy,6 Gy,8 Gy五种不同剂量分别作用于DLBCL细胞,在6,12,24,48,72,96小时观察DLBCL细胞的形态变化,同时应用MTS/pms比色法观察不同剂量照射后DLBCL细胞在不同时间的OD值,并计算细胞存活分数。3、应用流式细胞仪,分析不同剂量和照射后不同时间对DLBCL细胞的细胞周期和细胞凋亡影响。结果：1、复苏的DLBCL细胞生长良好,传代稳定,细胞形态规则,多呈圆形或类圆形。2、不同剂量组的OD值均低于正常对照组,在同一作用时间内剂量越大,OD值越低。经统计分析,8Gy照射组自6小时起,6Gy照射组自24小时起,4Gy照射组自48小时起,2Gy照射组自72小时起,OD值就与对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。不同照射组随着剂量的增大,细胞生长越缓慢。同时随着照射剂量增大,作用时间延长,细胞存活分数下降也越明显。3、细胞周期结果显示,在G2-M期,各照射组在6小时均呈现相对较低的比例(<17%),自12小时开始,各照射组与对照组相比,G2-M期细胞比例逐渐增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。同时8Gy剂量组G2-M期细胞比例逐渐升高,直到48小时也未见恢复,而2Gy、4Gy和6Gy剂量组在6-24小时内G2-M期细胞比例逐渐升高,至24小时后开始有所恢复。4、细胞凋亡结果显示,照射剂量越大,细胞凋亡指数越高。同一时间,不同剂量组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。随着时间延长细胞凋亡指数逐渐增加。5、将细胞周期和凋亡结果综合分析发现,在照射后12h,4Gy,6Gy和8Gy照射组开始出现明显凋亡,并随着时间的延长而逐渐增高。结合细胞周期曲线图,发现G2-M期自12h开始出现明显阻滞,提示凋亡可能主要来源于G2-M期。结论：1、X射线对DLBCL细胞的生长具有抑制作用,并呈明显的剂量依赖性和时间依赖性2、X射线对DLBCL细胞的周期影响主要是产生G2-M期阻滞。照射剂量越大,周期阻滞越严重,阻滞时间也越长。3、随着放射剂量的增加和作用时间的延长,细胞凋亡指数逐渐增高。4、DLBCL细胞在X射线照射后,随着G2-M期的启动,细胞凋亡也相继被启动,从而发生延期的间期凋亡。5、通过对DLBCL细胞周期和凋亡的研究,发现分割放疗以及特异性缩短G2-M期药物的应用可能会对肿瘤细胞起到更大的杀伤作用,从而为DLBCl治疗方案的调整提供了理论依据,并为其综合治疗提供了新的思路和方向。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-10
缩略语/符号说明  10-11
前言  11-14
  研究现状、成果  11-12
  研究目的、方法  12-14
对象和方法  14-19
  1 材料  14-15
    1.1 试剂  14
    1.2 仪器  14
    1.3 人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株  14-15
  2 方法  15-19
    2.1 实验试剂的配置  15
    2.2 细胞培养  15-18
    2.3 统计方法  18-19
结果  19-36
  1 DLBCL细胞的培养  19-21
    1.1 细胞生长情况及形态学观察  19
    1.2 生长曲线  19-21
  2 X射线对DLBCL细胞增殖的影响  21-36
    2.1 形态学改变  21-28
    2.2 MTS/pms法测定X射线对DLBCL细胞增殖的影响  28-30
    2.3 流式细胞仪检测X射线对DLBCL细胞周期和细胞凋亡的影响  30-36
讨论  36-47
  1 眼眶原发淋巴瘤的研究现状及存在的问题  36-39
    1.1 病因及临床特点  36-37
    1.2 病理学分类  37-38
    1.3 治疗  38-39
      1.3.1 化学治疗  38
      1.3.2 放射治疗  38-39
  2 DLBCL细胞实验研究对于眼眶弥漫大B细胞淋巴瘤的指导意义  39
  3. 放射线对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响  39-44
    3.1 放射线对肿瘤细胞周期的影响  39-42
    3.2 放射线对肿瘤细胞凋亡的影响  42-43
    3.3 放射线照射后肿瘤细胞周期和凋亡变化的关系  43-44
  4 X射线对DLBCL细胞增殖以及细胞周期和凋亡的影响  44-46
    4.1 X射线对DLBCL细胞增殖的影响  44
    4.2 X射线对DLBCL细胞周期和细胞凋亡的影响  44-46
  5 本研究的创新点与不足  46-47
结论  47-48
参考文献  48-54
发表论文和参加科研情况说明  54-55
综述 放射线对肿瘤细胞周期和凋亡的影响及相关机制  55-63
  综述参考文献  60-63
致谢  63

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 网状内皮系统肿瘤
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