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已酮可可碱（Pentoxifylline）对人肝癌细胞的放射增敏作用及其作用机制的研究

作　者: 吴德华
导　师: 陈龙华
学　校: 第一军医大学
专　业: 肿瘤放射治疗学
关键词: 己酮可可碱 放射增敏 G2期阻滞 凋亡 p53
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
下　载: 50次
引　用: 1次
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内容摘要


目的 应用药物提高肿瘤组织的放射敏感性是改善放射治疗疗效的主要研究方向之一。放射治疗可导致细胞周期阻滞在G2／M期，使肿瘤细胞获得时间修复DNA损伤，增加了细胞无限性增殖的能力，从而增加了放射治疗抗性。本研究观察己酮可可碱（pentoxifylline，PTX）对不同p53基因状态人肝癌细胞株照射后的放射增敏作用，探讨PTX增加放射敏感性的作用机制和临床意义。 方法 本研究以p53基因野生型的HepG2及缺失型Hep3b人肝癌细胞株为研究对象，应用MTT法检测PTX药物毒性，应用克隆形成实验（colony forming method）观察PTX对放射敏感性的影响，用流式细胞仪（flow cytometry，FCM）技术分析照射后HepG2和Hep3b细胞株细胞周期的再分布和PTX对放射引起的细胞周期阻滞的影响，同时用光学显微镜、电镜、荧光显微镜和流式细胞仪观察PTX对HepG2和Hep3b细胞凋亡的作用。 结果 1．不同浓度的PTX作用于人肝癌HepG2和Hep3b细胞株48h后，其细胞毒性呈剂量依赖性，最适浓度为2mmol／L。 2．在克隆形成实验中我们发现PTX能明显降低放射后HepG2和Hep3b细胞的克隆形成率，其放射增敏比分别为1.31±0.16、2.68±0.24，PTX对Hep3b细胞的放射敏感性增加更明显（P＜0.05）。 3．流式细胞仪实验结果显示，照射明显导致HepG2和Hep3b细胞株 G:期阻滞，HePGZ细胞株单纯照射组及6Gy照射+2ol几PTx 组的细胞在16hq/M期比例分别为53.2%和25.2%（P<0.05）， HeP3b细胞在照射后20h GZ叔期比例分别为86.8%和14.8%（P< 0.05），PTX能够去除放射引起的HePGZ和HeP3b细胞G:期阻滞， 但对HeP3b更敏感。4.细胞凋亡形态学结果显示，在普通光学显微镜、荧光显微镜及流 式细胞仪72小时观察HePGZ和HeP3b细胞株的连续照射+ PTX 组和单纯照射组凋亡率分别为10.6%、2.7%（P<0.05）;通过电镜也 观察到在两种细胞株中连续照射+PTX组较单纯照射组凋亡明 显。结论PTx对HePGZ和HeP3b细胞株均有放射增敏作用，但HeP3b细胞株较HePGZ细胞株的增敏作用强。其作用机制可能与PTx去除放射引起的G:期阻滞及促进受照细胞凋亡等多种因素有关，PTX可能对P53缺失型的细胞株更敏感。实验结果支持PTX在原发性肝癌放射增敏治疗上进行进一步的研究。

全文目录


英文缩略语对照表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
实验概况  10-11
前言  11-15
己酮可可碱(Pentoxifylline)对人肝癌细胞株的放射增敏作用及其作用机制的研究  15-37
  材料与方法  15-19
  结果  19-32
  讨论  32-37
全文小结  37-38
不足之处与后续工作  38-39
参考文献  39-44
综述  44-53
致谢  53-54
在读期间发表文章  54-55

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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