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UVB照射对酵母生长的影响及活酵母细胞衍生物应用
作 者: 郭建辉
导 师: 赵华
学 校: 天津科技大学
专 业: 发酵工程
关键词: 酵母 紫外线B照射 活酵母细胞衍生物 保湿
分类号: TQ920.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
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内容摘要
本论文研究了UVB照射培养对酵母菌生长、生理性能和活性成分的影响,确定了UVB照射培养后酵母细胞的最佳酶解条件,并对活酵母细胞衍生物(LYCD)在化妆品中的应用进行了研究。 1.UV-B照射会影响酵母菌的生长繁殖,尤其是在接种量较小时(小于1×10~7/mL),酵母菌生长受到UV-B的影响较明显,而在较大接种量时影响较小。使用pH5.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液配制培养基可以降低UV-B照射培养过程中酵母的死亡率。在UVB照射培养过程中,酵母细胞的絮凝性随培养时间的延长逐渐增强,说明酵母细胞在UVB照射培养过程中,细胞壁的组成发生了某些变化。 2.在UV-B照射培养过程中,酵母菌为抵御紫外线的伤害,细胞内会发生复杂的生物化学变化,各种活性物质的含量也随之发生变化,其中核酸、蛋白质、海藻糖、麦角甾醇和葡聚糖含量均有不同程度的提高,而酵母细胞中谷胱甘肽的含量和超氧化物歧化酶活性则均呈下降趋势。 3.对影响细胞酶解破壁的各单因素条件进行了研究,并结合正交试验分析,确定了破壁的最佳条件为:12%的酵母悬浮液中添加3%的蛋白酶(细胞干重),pH6.0,恒温50℃水浴震荡28h。添加1%的纤维素酶可以提高酶解破壁的效果。 4.对LYCD的主要成分进行了分析。认为其含有通过O-型糖肽键相连的小分子糖肽。 5.涂抹添加了LYCD的防裂护肤霜的皮肤电导率比涂抹普通护肤霜提高10-20%,说明添加LYCD的防裂护肤霜保湿效果得到较为明显的提高。
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全文目录
1. 前言 7-17 1.1 紫外线的生物学效应 7-11 1.1.1 紫外线辐射的物理特性和生物有效性 7-9 1.1.2 UVB对植物的影响 9 1.1.3 UVB对藻类的影响 9-10 1.1.4 UVB对微生物的影响 10 1.1.5 UVB对人体的损伤 10-11 1.2 UVB对生物伤害的分子生物学基础 11-13 1.2.1 紫外线对DNA的损伤和修复 11-12 1.2.2 UVB对蛋白质的影响 12-13 1.2.3 UVB对膜系统的影响 13 1.3 生物细胞对UVB辐射增强的反馈调控 13-14 1.4 活酵母细胞衍生物 14-16 1.4.1 定义 14-15 1.4.2 制备方法 15 1.4.3 酵母细胞衍生物的功能 15-16 1.5 本课题的研究目的和内容 16-17 1.5.1 研究目的 16 1.5.2 研究的主要内容 16-17 2. 材料与方法 17-30 2.1 材料 17-19 2.1.1 菌种 17 2.1.2 实验材料 17-19 2.2 实验方法 19-30 2.2.1 UVB照射培养方法 19 2.2.2 细胞数测定 19-20 2.2.3 pH的测定 20 2.2.4 细胞死亡率测定 20 2.2.5 酵母细胞壁葡聚糖的提取 20 2.2.6 菌体干重的测定 20 2.2.7 酵母细胞中核酸含量的测定 20-21 2.2.8 酵母细胞蛋白质含量的测定 21-22 2.2.9 谷胱甘肽(GSH)的测定 22-23 2.2.10 超氧化物歧化酶(SOD)的测定 23-25 2.2.11 过氧化氢酶(CAT)测定 25 2.2.12 过氧化物酶(POD)的测定:联苯胺法测定 25 2.2.13 海藻糖的测定: 硫酸蒽酮比色法 25-26 2.2.14 酵母细胞中麦角固醇含量的测定 26-27 2.2.15 葡聚糖含量的测定 27-28 2.2.16 a-氨基氮测定 28 2.2.17 酵母水解液的制备 28 2.2.18 高频电导测定法 28-29 2.2.19 糖肽键的测定 29-30 3. 结果与讨论 30-49 3.1 UVB照射对酵母菌生长的影响 30-33 3.1.1 接种量对UV-B照射条件下酵母生长的影响 30-31 3.1.2 培养液pH对酵母菌生长的影响 31-32 3.1.3 培养条件对UV-B照射下酵母菌死亡率的影响 32-33 3.1.4 UVB照射对酵母菌凝聚性的影响 33 3.2 UVB照射培养对酵母菌生理活性物质的影响 33-39 3.2.1 UV-B照射培养对酵母细胞核酸含量的影响 33-34 3.2.2 UV-B照射培养对酵母细胞蛋白质含量的影响 34-35 3.2.3 UV-B照射培养对酵母细胞GSH含量的影响 35 3.2.4 UV-B照射培养对酵母细胞SOD含量的影响 35-36 3.2.5 UVB照射培养对酵母细胞CAT和POD含量的影响 36-37 3.2.6 UV-B照射培养对酵母细胞海藻糖含量的影响 37 3.2.7 UV-B照射培养对酵母细胞麦角甾醇含量的影响 37-38 3.2.8 UV-B照射培养对酵母细胞壁葡聚糖含量的影响 38-39 3.3 活酵母细胞衍生物的制备 39-43 3.3.1 加酶量的选择 39-40 3.3.2 破壁时间 40 3.3.3 温度的选择 40-41 3.3.4 活酵母细胞衍生物的制备条件的优化 41-42 3.3.5 添加纤维素酶对破壁效果的影响 42-43 3.4 活酵母细胞衍生物成分分析 43-46 3.4.1 重金属离子和氨基酸含量分析 43 3.4.2 活性糖肽的的提取 43-44 3.4.3 糖肽的性质研究 44-46 3.5 活酵母细胞衍生物在化妆品中的应用 46-49 3.5.1 防裂护肤霜的配制 46 3.5.2 保湿性能的检测 46-49 4. 总结与展望 49-51 参考文献 51-55 研究生期间发表论文情况 55-56 致谢 56
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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 其他化学工业 > 发酵工业 > 一般性问题 > 基础理论
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