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吡咯喹啉醌对神经细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及机制研究

作　者: 郭青
导　师: 吕国枫
学　校: 大连医科大学
专　业: 运动医学
关键词: 吡咯喹啉醌氧糖剥夺/复氧凋亡神经细胞脑缺血
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:脑缺血后的病理生理过程复杂,脑缺血再灌注损伤级联反应其中一环是细胞凋亡,抑制神经细胞凋亡有利于缺血性脑血管病的治疗和康复。近期国内外研究表明,吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone ,PQQ)具有较强的抗氧化作用,可能通过抗氧化应激对脑缺血有保护作用。而氧化应激反应被认为是导致凋亡的最重要途径之一,因此本文研究吡咯喹啉醌(PQQ)是否具有抗凋亡作用及其可能机制。研究吡咯喹啉醌(PQQ)对体外培养小鼠神经母细胞瘤Neuro2A细胞株氧糖剥夺/复氧模型(OGD/R)的影响,在细胞水平探讨PQQ神经保护作用的可能机制。方法:利用不同浓度PQQ预处理Neuro2A细胞后,通过无氧密闭盒和无糖培养液,建立氧糖剥夺模型。取复氧后6h这一时间点,观察PQQ干预对Neuro2A细胞的细胞形态、存活率、凋亡率以及氧化应激检测指标活性氧(ROS)和还原型谷胱甘肽(GSH)的影响。细胞形态学采用倒置相差显微镜观察;细胞存活率采用四唑盐(MTT)法检测;细胞凋亡率采用荧光显微镜观察;ROS和GSH采用荧光分光光度计检测。结果:一.倒置相差显微镜观察细胞形态:OGD 2h复氧6h后Neuro2A细胞形态出现严重损伤,6.4μM和12.8μM的PQQ预处理有减轻神经细胞损伤的作用;二.MTT法检测细胞存活率:OGD 2h复氧6h后,0‐12.8μM的PQQ预处理组细胞的存活率呈逐渐增高趋势(P<0.05)。三.荧光显微镜下计数细胞凋亡率:OGD 2h复氧6h后,6.4μM、12.8μM的PQQ预处理组和OGD无保护组相比细胞凋亡数逐渐减少(P<0.05)。四.PQQ预处理后细胞内ROS生成减少(P<0.01),GSH水平增高(P<0.05),与氧糖剥夺/复氧组相比有统计学差异。结论:一.PQQ对神经细胞氧糖剥夺损伤有一定的保护作用。二.PQQ对氧糖剥夺损伤的Neuro2A细胞的神经保护作用可能是通过减轻氧化应激反应,降低细胞凋亡率来实现的。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-9
前言  9
材料和方法  9-12
结果  12-16
讨论  16-19
结论  19-20
参考文献  20-23
综述  23-31
  参考文献  28-31
附录  31-33
致谢  33

吡咯喹啉醌对神经细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及机制研究

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