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全脑缺血再灌注大鼠海马CA1区Ngb与Caspase-3的相关性研究

作　者: 陈长林
导　师: 张兴毅
学　校: 遵义医学院
专　业: 内科学
关键词: 脑缺血/再灌注损伤脑红蛋白 Caspase-3 凋亡
分类号: R741
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：通过观察全脑缺血再灌注后Sprague-Dawley(SD)大鼠海马CA1区脑红蛋白(Ngb)与Caspase-3的时间变化关系,分析脑红蛋白与Caspase-3表达时间的规律性及其两者的相关性机制,为临床抗缺血损伤提供参考依据。方法：随机将60只健康SD大鼠雌雄各半随机分为全脑缺血／再灌注(I/R)组,假手术(SO)组。每组按其再灌注的时间又分为3、6、12、24、48小时(h)共5个观察时间点,每个时间点6只大鼠,采用改良的Pulsinelli等四血管阻塞法(椎动脉留置针法)建立大鼠脑I/R损伤的模型。两组于再灌注后腹腔注射生理盐水(0.5ml/kg),并每6h注射一次,在相应的时间点断头取脑。用免疫组化法和原位杂交法检测海马CA1区锥体细胞中Ngb及Caspase-3的表达,测量其平均光密度值(OD),用苏木精-伊红(HE)染色检测存活锥体细胞数,用TUNEL原位末端标记法检测凋亡锥体细胞,并计算凋亡率。结果：在SO组,Caspase-3蛋白及Caspase-3 mRNA、Ngb蛋白及Ngb mRNA各时间点表达的平均光密度值对比差异无统计学意义(P>0.05),存活神经元细胞数及细胞凋亡率的各时间点比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在I/R组,Caspase-3蛋白及Caspase-3 mRNA在缺血再灌注后3小时开始表达,24小时达高峰,48小时后逐渐下降,24小时与3、6、12、48小时比较差异有统计学意义(P<0.05)；Ngb蛋白及Ngb mRNA在缺血再灌注后3、6小时弥散表达,3、12、24、48小时与SO组比较差异有统计学意义(P<0.05)；存活神经元细胞数及细胞凋亡率的各时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。SO组各时间点的Caspase-3和Ngb比较差异无统计学意义(P>0.05)。I/R组各时间点的Caspase-3和Ngb比较差异有统计学意义(P<0.05)。Ngb与Caspase-3呈负相关(r=-0.882,P<0.05)；Ngb与细胞凋亡率呈负相关(r=-0.984,p<0.01); Caspase-3与细胞凋亡率呈正相关(r=0.994,P<0.01)。结论：(1)脑缺血再灌注损伤后Caspase-3呈时间递增性表达,Ngb呈递减性表达;(2) Caspase-3与Ngb呈负相关性,Ngb可能抑制细胞的凋亡。

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英文缩略词对照表 5-6中文摘要 6-8Abstract 8-10前言 10-11材料与方法 11-18结果 18-25讨论 25-30结论 30-31参考文献 31-35附图 35-41综述 41-51 参考文献 47-51致谢 51-52作者简介 52

全脑缺血再灌注大鼠海马CA1区Ngb与Caspase-3的相关性研究

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