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农吉利中有效成分的提取分析研究

作　者: 樊轻亚
导　师: 范华均
学　校: 广东药学院
专　业: 药物化学
关键词: 农吉利 生物碱 黄酮 微波辅助提取 指纹图谱 HPLC LC-ESI-MS/MS
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 132次
引　用: 2次
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内容摘要


农吉利(Crotalaria sessiliflora L.)为豆科猪屎豆属植物野百合的干燥全草,功能为清热、利湿、解毒。在我国广泛用于多种疾病的治疗,主治痢疾、疮疖、耳鸣耳聋、头晕目眩及各种癌症如皮肤鳞状上皮癌、食管癌、宫颈癌等。目前的研究表明农吉利中含有生物碱、黄酮类化合物等有效化学成分。本文采用了微波强化提取农吉利中有效化学成分生物碱和黄酮化合物,系统地研究了在微波作用下各种因素对提取的影响,探讨了农吉利中生物碱和黄酮化合物提取的工艺方法和优化条件,利用色谱、光谱及色谱质谱联用技术建立了生物碱和黄酮化合物的分析方法和指纹图谱方法,为更深入地研究和开发农吉利有效化学成分打下基础,尚未见相关的系统研究报道。本文进行了下述研究工作:1、采用溶剂回流提取法(SRE)、微波辐射-溶剂回流提取(MISRE)、聚焦微波辅助提取法(FMAE)提取农吉利中的有效化学成分生物碱和黄酮类化合物。结果表明,与常规的SRE相比,采用诸如MISRE和FMAE微波辅助方式提取,生物碱和黄酮类化合物的提取率明显提高,其中FMAE提取效果最佳,表明农吉利药材在微波的作用下,能强化生物碱和黄酮类化合物的提取过程。2、利用酸性染料溴麝香草酚蓝显色和牡荆素对照品表征,采用分光光度法分别建立了测定农吉利提取液中总生物碱和总黄酮的分析方法;采用高效液相色谱法,还建立了农吉利中的主要有效成分农吉利甲素、牡荆素和异牡荆素的含量的HPLC分析方法。将方法分别应用于不同产地农吉利中的总生物碱、总黄酮以及农吉利甲素、牡荆素和异牡荆素等主要有效成分的分析,结果较为满意。3、采用LC-ESI-MS/MS分析了农吉利提取液中的黄酮和生物碱化合物,通过一级、二级质谱分析和对照品验证,已确定提取液中含有荭草素、异荭草素、牡荆素和异牡荆素四种黄酮化合物和一种生物碱即农吉利甲素,并推断出另外三种化合物的分子结构,初步了解了农吉利提取液中的主要有效化学成分。4、采用指纹图谱方法建立了农吉利黄酮和生物碱的高效液相色谱指纹图谱的方法。通过分析液相色谱的指纹图谱,确立9个峰为黄酮指纹图谱的共有峰,4个峰为生物碱的共有峰。利用中药色谱指纹图谱相似度评价方法及软件进行了数据处理和评价,农吉利10批样品的相似度均在0.9以上,表明农吉利10个批次间指纹特征明显,相似度良好,适合于药材的鉴别。

全文目录


中文摘要  7-9
英文摘要  9-11
第一章 绪论  11-20
  1.1 概述  11
  1.2 农吉利的药用历史  11-12
  1.3 农吉利的主要化学成分  12-13
    1.3.1 生物碱类化合物  12
    1.3.2 黄酮类化合物  12-13
  1.4 农吉利的药理毒理研究  13-14
    1.4.1 抗肿瘤作用  13
    1.4.2 其他药理作用  13-14
    1.4.3 毒副作用  14
  1.5 中药有效成分的提取  14-16
    1.5.1 微波辅助提取的原理和特点  14-15
    1.5.2 微波辅助技术在中药有效成分提取的应用  15-16
  1.6 中药有效成分的分析  16-18
    1.6.1 分光光度法  16-17
    1.6.2 色谱分析法  17-18
    1.6.3 电化学分析法  18
  1.7 中药指纹图谱及LC-MS/MS 的研究  18-19
    1.7.1 指纹图谱的定义及建立指纹图谱的方法  18
    1.7.2 LC-MS/MS 联用技术  18-19
  1.8 本课题的研究目的及意义  19-20
第二章 农吉利生物碱的提取与分析  20-44
  2.1 前言  20-21
  2.2 仪器和试剂  21
  2.3 实验方法  21-22
    2.3.1 农吉利生物碱的提取  21-22
    2.3.2 生物碱的分析条件  22
  2.4 结果与讨论  22-42
    2.4.1 农吉利生物碱提取工艺研究  22-34
    2.4.2 生物碱的分析  34-42
  2.5 小结  42-44
第三章 农吉利黄酮的提取与分析  44-63
  3.1 前言  44
  3.2 仪器和试剂  44-45
  3.3 实验方法  45-46
    3.3.1 农吉利黄酮的提取  45
    3.3.2 黄酮的分析条件  45-46
  3.4 结果与讨论  46-62
    3.4.1 农吉利黄酮提取工艺研究  46-53
    3.4.2 农吉利黄酮的分析  53-62
  3.5 小结  62-63
第四章 农吉利有效成分的LC -MS/MS 分析  63-76
  4.1 前言  63
  4.2 仪器与试剂  63-64
  4.3 实验方法  64-65
    4.3.1 样品溶液的制备  64
    4.3.2 LC-MS 分析条件  64-65
  4.4 结果与讨论  65-75
    4.4.1 农吉利黄酮的LC-MS/MS 研究  65-70
    4.4.2 农吉利中生物碱 LC-MS/MS 分析  70-75
  4.5 小结  75-76
第五章 农吉利指纹图谱的研究  76-94
  5.1 前言  76
  5.2 仪器与试剂  76-77
  5.3 实验方法  77-78
    5.3.1 对照品溶液的制备  77
    5.3.2 样品溶液的制备  77
    5.3.3 色谱条件  77-78
  5.4 结果和讨论  78-93
    5.4.1 农吉利中黄酮的指纹图谱研究  78-86
    5.4.2 农吉利中生物碱的指纹图谱研究  86-92
    5.4.3 相似度分析  92-93
  5.5 小 结  93-94
参考文献  94-102
攻读学位期间发表的论文  102-103
致谢  103

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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