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赤芍商品药材调查及品质评价研究

作　者: 杨昌林
导　师: 刘友平
学　校: 成都中医药大学
专　业: 药物化学
关键词: 赤芍栽培品资源活性成分指纹图谱品质
分类号: R282.71
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

赤芍为历版《中国药典》收载品种,来源于毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall或川赤芍Paeonia veitchii Lynch的干燥根,具有清热凉血,散瘀止痛等功效,为临床常用中药。其中,川赤芍只有野生资源,芍药栽培野生皆有且栽培资源丰富,但传统认为仅有川赤芍与野生芍药根晒干才可作赤芍入药。随着环境的改变以及其它人为因素,野生资源破坏严重,逐年枯竭,同时期芍药栽培产业则得到不断发展,市场调查发现栽培芍药根直接阴干作赤芍用现象已较为普遍。但栽培芍药与野生资源二者在地域分布、生长环境、化学成分的组成比例与含量等方面均存在一定差异,赤芍商品药材现状如何?栽培的芍药作赤芍用有无科学依据?如何对其进行科学评价?有待进一步研究。本文首次对赤芍药材进行了系统商品调查、对野生芍药与栽培芍药品质进行了系统比较研究,为拓展赤芍药材来源、为栽培芍药作赤芍药用提供了科学依据,对保护生态资源,促进中药可持续发展具有重要意义。研究内容如下：1.药材商品调查采用实地调查、电话咨询等多种手段对赤芍药材资源的主要分布区及商品药材情况做了调查分析,收集药材64批次。赤芍药材资源分布广泛,鉴定出收集的64批次药材中29批为川赤芍、12批为野生芍药、23批为栽培芍药,内蒙古、河北、吉林、四川、安徽、浙江以及全国其它大部分省市均有分布,其中,野生资源破坏严重,资源蕴藏量下降,有赤芍道地产区之称的内蒙多伦野生芍药已处于生产性濒危状态(与以往文献报道吻合)：而芍药栽培产业则不断发展,四川中江、渠县,安徽毫州,浙江杭州等地已建立了GAP基地,按物种与生产方式结合来定义赤芍,已有相当部分可作赤芍药用,产量逐年增加。市场方面,赤芍商品药材品种复杂,用药混乱,栽培芍药大量被当作赤芍销售,川赤芍、野生芍药、栽培芍药均在作为赤芍药用的来源,形成了赤芍商品药材的三大主要来源。然而,三大主要来源药材质量均符合药典标准、部局标准,价格稳中有升,销售渠道多样化,大量出现的栽培芍药当赤芍用现象,已使赤芍商品药材现状较之于传统发生了改变,此部分为课题组首次发现。2.性状及显微特征比较研究性状及显微特征比较为中药材内在质量控制的一个重要定性指标,本文对野生芍药与栽培芍药根的外观性状、细胞器及其内容物进行了比较研究,重点比较了其薄壁细胞、簇晶、导管、淀粉粒、木栓细胞、方晶的形态大小,结果表明：芍药与栽培芍药根的外观性状、细胞器及其内容物具有显著差异。3.活性成分比较研究通过HPLC,对野生芍药与栽培芍药中的芍药总苷(TGP)、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(PGG)、苯甲酸及儿茶素进行含量测定,研究栽培芍药与野生品化学成分差异及共性。结果表明：栽培芍药与芍药野生品主要化学成分相同,且各活性成分含量范围也存在交叉,为栽培芍药作赤芍药用提供了一定的科学依据。然而通过非参数检验分析表明(Mann-Whitney U检验),23批栽培芍药与12批芍药野生品之间芍药苷(PAE)、赤芍总苷(TPG)、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(PGG)、总酚、鞣质及苯甲酸的含量都有显著性差异(P<0.05),且从各成分的平均含量来看,除PAE及PGG外,栽培芍药中赤芍总苷(TPG)、鞣质、总酚及苯甲酸的含量远高于野生芍药。由此可见,栽培芍药与野生芍药的化学品质之间存在一定的差异。4.指纹图谱比较研究本实验以含量基本稳定的12批野生芍药、23批栽培芍药为对象,研究了芍药药材的HPLC指纹图谱。首先建立了芍药药材指纹图谱检测方法,色谱柱：Coma-tex C18(250mm×4.6mm,5μm)；流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,记录54min色谱图;检测波长：230nm;柱温：30℃；流速：1.0mL/min;进样量：10μL。其后,运用国家药典委员会发布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)分别对上述12批野生芍药与23批栽培芍药进行指纹图谱分析,标定了其中13个共有色谱峰,提取其共有峰生成各自标准图谱。最后,对所生成的标准色谱图进行相似度评价,结果发现野生芍药标准指纹图谱与栽培芍药标准指纹图谱间相似度为0.885<0.9,表明栽培芍药与野生芍药品质之间存在一定差异性,运用指纹图谱技术能较好的反映二者品质之间的差异。5.初步药效学比较研究研究探索采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高及醋酸致小鼠扭体反应实验,比较栽培芍药与野生芍药的药理作用。实验表明：二者均有抗炎、镇痛作用,且野生芍药的抗急性炎症作用优于栽培芍药。然而本实验给药均为水煎液,是一个含有多种成分的复杂的溶液,何种或者哪几种成分为主要有效成分,各成分含量如何未作深入研究,有待探讨。

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中文摘要 3-6Abstract 6-111 前言 11-17 1.1 研究现状 11-16 1.1.1 本草学考证 11-12 1.1.2 商品药材调查 12 1.1.3 化学成分 12-14 1.1.4 药理作用 14-15 1.1.5 品质评价 15-16 1.2 立题依据 16 1.3 研究工作内容 16-17 1.3.1 赤芍商品药材调查 16 1.3.2 性状及显微特征比较研究 16-17 1.3.3 活性成分比较研究 17 1.3.4 指纹图谱比较研究 17 1.3.5 初步药效学比较研究 172 药材调查部分 17-22 2.1 赤芍药材资源现状调查 18-20 2.1.1 川赤芍 19 2.1.2 野生芍药 19 2.1.3 栽培芍药 19-20 2.2 赤芍药材市场调查 20-22 2.2.1 赤芍药材质量调查 20-21 2.2.2 赤芍药材价格调查 21 2.2.3 赤芍药材走向调查 21-22 2.3 讨论 223 品质评价部分 22-65 3.1 实验仪器与材料 22-25 3.1.1 实验仪器 22-23 3.1.2 材料及试剂 23 3.1.3 药材 23-25 3.2 性状及显微特征比较研究 25-27 3.2.1 外观性状 25-26 3.2.2 显微比较 26-27 3.3 活性成分比较研究 27-51 3.3.1 芍药苷(PAE)及苯甲酸的含量测定 28-36 3.3.2 芍药总苷(TPG)的含量测定 36-41 3.3.3 总酚及鞣质的含量测定 41-47 3.3.4 1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(PGG)的含量测定 47-50 3.3.5 讨论 50-51 3.4 指纹图谱比较研究 51-60 3.4.1 药材指纹图谱获取方法研究 51-57 3.4.2 赤芍药材的筛选 57-58 3.4.3 标准指纹图谱的建立 58-59 3.4.4 品质评价研究 59-60 3.4.5 讨论 60 3.5 初步药效学比较研究 60-61 3.6 结论 61-65参考文献 65-69致谢 69-70在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 70-71

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