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洛伐他汀和地塞米松对成骨细胞凋亡及Caspase-3活性影响的实验研究

作 者: 吴雪琳
导 师: 张天宏
学 校: 遵义医学院
专 业: 骨外科
关键词: 洛伐他汀 地塞米松 成骨细胞 凋亡 Caspase-3
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要


目的:研究观察超生理剂量地塞米松成骨细胞调亡及caspase-3表达产生的影响;观察加用洛伐他汀后对地塞米松引起的成骨细胞凋亡及caspase-3活性的影响。方法:(1)用改良组织块法培养SD大鼠乳鼠颅骨的成骨细胞,用差速贴壁法进行纯化;(2)从形态学,碱性磷酸酶染色(偶氮偶联法)和矿化结节染色(茜素红法)方面对成骨细胞进行鉴定:(3)取生长旺盛的第3-5代成骨细胞随机分为空白组:培养基中含配制辛伐他汀溶液的对照液;对照组:培养基中含地塞米松(1×10-6mol/l)和配制辛伐他汀溶液的对照液;实验组:分4组,各组培养基中含地塞米松(1×10-6mol/l)+洛伐他汀(1×10-6mol/l,1×10-6mol/l,1×10-7mol/l,1×10-6mol/l):每组细胞分别培养24,48,72小时后作检测;(4)用细胞凋亡Hoechst33258荧光检测试剂盒和Caspase-3分光光度法检测试剂盒检测各组加入培养基24h、48h、72h后成骨细胞的凋亡率及caspase-3的活性。结果:(1)培养出来的细胞具有成骨细胞的形态特征,碱性磷酸酶染色和矿化结节染色为阳性;(2)与空白组相比,对照组地塞米松(10-6mol/l)对成骨细胞的凋亡率及caspase-3的活性均有促进作用,差异有统计学意义(P<0.05),48h达高峰;(3)与对照组相比,洛伐他汀浓度为10-6mol/l、10-7mol/l、10-6mol/l的实验组对成骨细胞的凋亡率及caspase-3的活性有抑制作用,差异有统计学意义(P<0.05):10-6mol/l浓度实验组上述指标与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)地塞米松能够诱导成骨细胞凋亡,增加成骨细胞caspase-3的活性:(2)洛伐他汀可部分抑制地塞米松诱导的成骨细胞的凋亡,且有一定浓度依赖性:(3)地塞米松诱导体外培养的成骨细胞凋亡部分通过激活caspase-3实现的。(4)洛伐他汀抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡与其抑制地塞米松引起的caspase-3激活有关。

全文目录


英汉缩略词对照表  4-5
中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
材料与方法  10-15
结果  15-21
讨论  21-27
结论  27-28
参考文献  28-31
综述 他汀类药物对骨代谢影响的研究进展  31-46
  参考文献  40-46
致谢  46

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