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碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜细胞整合素β1亚单位表达的影响
作 者: 李红艳
导 师: 林崇韬
学 校: 吉林大学
专 业: 口腔临床医学
关键词: 碱性成纤维细胞生长因子 牙周膜细胞 整合素β1亚单位 细胞黏附 牙周组织再生
分类号: R781.4
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
牙周病的治疗目的是去除病因,消除炎症,使破坏的组织修复、再生,以恢复其原有的结构和功能。在牙周组织创伤愈合的4种来源细胞中,只有牙周膜细胞具有牙周组织再生的能力。碱性成纤维细胞生长因子具有多种生物学作用,是有丝分裂促进因子,有很好的发展潜能。整合素是一个细胞表面受体家族,是介导细胞与细胞外基质黏附作用的主要因子,由α和β亚基组成,其中β亚基是细胞黏附所必需的,牙周膜细胞在牙齿根面的黏附是牙周组织再生至关重要的第一步,整合素可能在此过程中起了决定性的作用。因此本研究应用碱性成纤维细胞生长因子刺激体外培养的人正常牙周膜细胞,用实时荧光定量PCR法反应检测牙周膜细胞内整合素β1亚单位基因表达的变化来探讨碱性成纤维细胞生长因子促进牙周膜细胞黏附的机制,进一步探讨碱性成纤维细胞生长因子在牙周组织损伤修复和再生中的作用,为牙周组织再生奠定部分理论基础。
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全文目录
内容提要 4-7 第1章 前言 7-9 第2章 实验仪器与试剂 9-11 2.1 主要仪器与设备 9 2.2 主要试剂及药品 9-11 第3章 实验方法与步骤 11-18 3.1 人正常牙周膜细胞的取材、培养和扩增 11-12 3.1.1 原代培养 11 3.1.2 传代培养 11 3.1.3 细胞冻存 11-12 3.1.4 细胞复苏 12 3.2 人正常牙周膜细胞的鉴定 12-13 3.2.1 制备细胞爬片 12 3.2.2 免疫组织化学SP 法进行抗波形丝蛋白、角蛋白染色 12-13 3.2.3 对照设置 13 3.3 外源性 bFGF 刺激体外培养的人牙周膜细胞 13 3.4 RT-FQ-PCR 法检测整合素β1 亚单位(integrin β1)的 mRNA 水平 13-17 3.4.1 引物设计 13 3.4.2 细胞总RNA 的提取 13-14 3.4.3 甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测总RNA 的提取效果 14-15 3.4.4 总RNA 纯度检测 15 3.4.5 RT 反应 RNA 转化成 cDNA 15 3.4.6 RT-FQ-PCR 15-17 3.5 数据整理,统计分析 17-18 第4章 结 果 18-22 4.1 人正常 PDLCs 的原代培养、扩增 18 4.2 人正常 PDLCs 的鉴定 18-19 4.3 外源性 bFGF 刺激人正常 PDLCs 19 4.4 RNA 提取结果鉴定 19 4.5 RT-FQ-PCR 结果及数据分析 19-22 第5章 讨论 22-29 5.1 牙周膜细胞概论 22-23 5.2 碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF) 23-26 5.2.1 bFGF 的表达 23-24 5.2.2 bFGF 在炎症及创伤修复中的作用 24 5.2.3 bFGF 在牙周组织再生中的作用 24-26 5.3 整合素 26-29 5.3.1 整合素的结构及功能 26 5.3.2 整合素与牙周组织改建 26-27 5.3.3 整合素参与细胞因子、细胞外基质的调节 27-29 第6章 结 论 29-30 参考文献 30-34 附录 34-38 攻读学位期间发表的学术论文 38-39 致谢 39-41 中文摘要 41-44 ABSTRACT 44-47
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中图分类: > 医药、卫生 > 口腔科学 > 口腔内科学 > 牙周病
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