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α1，3岩藻糖基转移酶Ⅳ（Fut4）表达上调增加鳞状癌细胞scc12转移潜能

作　者: 韩莉
导　师: 燕秋
学　校: 大连医科大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: Fut4 scc12细胞肿瘤转移细胞黏附
分类号: R730.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:癌症患者晚期肿瘤转移是临床上导致死亡的主要原因。转移是恶性肿瘤特有的一个复杂过程,肿瘤细胞从瘤块中脱落,黏附并穿入血管进入血循环,之后再穿透血管壁,在正常的组织细胞中生长繁殖而最后形成转移灶,此过程需要多种分子的参与。肿瘤细胞表面的糖分子与肿瘤细胞的黏附和转移密切相关。岩藻糖基转移酶是一类催化岩藻化寡糖合成的酶类,其中α1,3岩藻糖基转移酶IV (Fut4) ,是合成细胞表面唾液酸化的Lewis Y(LeY)的特异性合成酶基因, Lewis抗原是一组存在于细胞表面糖脂和糖蛋白链上的糖类抗原。α1,3岩藻糖基转移酶IV参与Lewis糖链合成最后一步的岩藻糖基化反应,其功能主要是催化GDP-Fuc的Fuc转移至糖链中N-乙酰氨基乳糖单位的N-乙酰氨基葡萄糖上。Fut4在白细胞和上皮细胞中表达,在肿瘤细胞中表达异常,如胰腺癌,肠癌中Fut4表达明显升高。鳞状细胞癌亦称鳞癌,是由鳞状上皮细胞发生的癌变,临床上如皮肤癌,喉癌,肺癌,宫颈癌,乳腺癌等均属于鳞状细胞癌。在我国,鳞状细胞癌发病率很高。因此,揭示鳞状细胞癌的发生发展,研究细胞表面糖链分子与鳞状细胞癌scc12细胞转移及黏附的关系,为鳞状细胞癌的治疗和预后评价提供一定的理论基础。本文通过观察上调Fut4基因表达对鳞状癌细胞scc12细胞恶性转化行为的影响,探讨Fut4促进肿瘤转移作用的分子机理。方法:本文选取鳞状癌细胞(scc12细胞系),并对其进行细胞培养,提取Fut4过表达质粒及空质粒,应用细胞转染实验,将Fut4过表达质粒及空质粒载体分别转染至scc12细胞中;应用RT-PCR和Western blot印迹检测转染后的Fut4的mRNA及蛋白的表达;采用细胞划痕实验,分别观察转染Fut4过表达质粒的scc12细胞及转染空质粒的scc12细胞的转移,侵袭情况;再应用细胞黏附实验进一步对细胞的转移,黏附情况进行分析,并于未转染的scc12细胞作对照。结果:RT-PCR,Western blot印迹检测结果显示,当Fut4过表达质粒转染至scc12细胞中, Fut4过表达质粒转染组的mRNA及蛋白表达明显升高;Fut4过表达质粒转染组scc12细胞的转移能力明显高于空质粒转染组及未转染细胞组;细胞黏附实验也显示了Fut4过表达质粒转染组scc12细胞的黏附能力明显高于空质粒转染组及未转染细胞组。结论:α1,3岩藻糖基转移酶(Fut4)的基因表达在鳞状癌细胞scc12细胞的转移过程中起到重要作用,Fut4基因表达增高,scc12细胞的转移,黏附能力增强,有助于更好的了解岩藻糖基转移酶在鳞状细胞癌恶性转化行为中的作用,并将为运用糖生物学对肿瘤细胞转移和黏附过程的探讨提供新的思路和手段。

全文目录

摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-11
材料和方法  11-19
结果  19-21
讨论  21-24
结论  24-25
参考文献  25-27
综述  27-34
  参考文献  31-34
致谢  34

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 一般性问题 > 肿瘤病理学、病因学
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