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全氟化合物的量子点荧光生物检测方法研究

作　者: 张炯
导　师: 舒柏华；徐顺清
学　校: 华中科技大学
专　业: 卫生检验与检疫
关键词: 全氟化合物量子点荧光生物检测
分类号: R123.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:本研究根据全氟化合物中的全副辛烷磺酸基化合物(PFOS)、全氟辛酸(PFOA)与过氧化物酶增值激活受体(PPARα)特异性结合的特性和新型荧光标记物量子点(QDs)建立一种全新的针对环境水体中PFCs的快速、高通量的分子生物学荧光检测方法。方法:制备PFOS-BSA复合体并将其包被在酶标板上,加入各浓度组标准品PFOS与固定的PFOS竞争激活PPARα,之后将PPARα-PFOS复合体转移至包被PPARα特异性抗体的酶标板中进行固定。将Biotin标记的DNA探针加入到酶标板中,再用QDs作为荧光标记物,通过亲和素-生物素系统标记在PPRE的DNA双链上,构成特异性量子点荧光探针,最后通过检测结合在PFOS激活的PPARα受体上的荧光探针的信号强度来定量检测PFOS,之后根据荧光强度和对应实验组的PFOS浓度绘制标准曲线,利用该方法同样对PFOA进行检测。按照国家标准采集环境水样并进行预处理,分别用上述方法和高效液相色谱质谱联用(HPLC/MS)方法进行检测,根据检测结果和标准曲线计算得出环境水样中PFCs的浓度。结果:利用QDs荧光生物检测方法通过测量不同浓度的PFOS、PFOA标准品,检测QDs信号的变化并绘制出标准曲线(PFOS: y = 19.112x-23.995, R~2 = 0.9642; PFOA: y = 17.601x-20.914, R~2 = 0.973),结果显示该方法在浓度为2.5 ng/L—75 ng/L范围内线性最优并具有良好的重复性,最低检测限为2.5 ng/L,加标回收率分别为107.8 %和110.3%根据不同浓度的标准品检测结果的峰面积绘制标准曲线(PFOS: y = 2E-05x-26.479, R~2 = 0.996; PFOA: y = 2E-05x-25.023, R~2 = 0.997),结果显示该方法浓度2.5 ng/L—75 ng/L范围内具有良好的重复性,最低检测限为1 ng/L,加标回收率分别为104.3 %和105.9 %。分别用两种方法对长江(武汉段)、汉江(武汉段)、东湖、武汉市某水厂以及某品牌桶装饮用水水样中PFCs浓度进行检测,两种方法的检测结果一致性良好。结论:QDs荧光生物检测方法在实际环境水样PFCs检测中具有突出的优势,它既具备了免疫荧光方法的快速和简便的特点,并且通过应用新型荧光标记物QDs,相对于传统荧光技术提高了灵敏度和准确性,节约了时间和经济成本,在大样本量的筛选方面有广阔的应用前景。

全文目录

中英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-11
前言  11-14
第一部分应用量子点建立高通量荧光生物检测全氟化合物的方法  14-24
  材料与方法  14-20
  结果  20-22
  讨论  22-24
第二部分量子点荧光生物检测方法检测环境水样中全氟化合物  24-33
  材料与方法  24-27
  结果  27-30
  讨论  30-32
  结论  32-33
参考文献  33-38
综述全氟辛烷磺酰基化合物（PFOS）的环境污染现状及检测技术研究进展  38-56
  参考文献  48-56
附录  56-57
致谢  57

全氟化合物的量子点荧光生物检测方法研究

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