学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

鸡杆菌地方分离株耐药性及耐药基因的研究

作　者: 郭伦涛
导　师: 王川庆
学　校: 河南农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 鸡杆菌耐药性耐药基因链霉素磺胺氟喹诺酮类药物 PCR方法
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 46次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载

内容摘要

鸡杆菌以侵害蛋鸡的呼吸道和生殖道为主,但其对鸡具体的致病性机制尚不清楚。目前,国内外有关鸡杆菌耐药状况的报道较小,养殖户在临床用药时,缺乏可靠的理论依据,用药比较盲目,往往造成严重的经济损失,因此开展鸡杆菌地方分离株耐药性及耐药基因的研究调具有十分重要的意义。本研究首先对鸡杆菌的耐药性进行了调查,在此基础上,进行质粒介导的链霉素和磺胺耐药机制的研究及鸡杆菌对氟喹诺酮类药物耐药机制的研究;为了便于耐药性和耐药基因的调查,对链霉素耐药基因三重PCR检测方法和磺胺类药物耐药基因二重PCR检测方法也进行了研究。通过鸡杆菌的耐药性调查可知,该细菌对头孢曲松(CRO)、头孢哌酮和头孢吡肟高度敏感,对阿米卡星、庆大霉素、四环素、强力霉素也也较敏感,但对磺胺甲恶唑、链霉素、诺氟沙星,氧氟沙星、环丙沙星、克林霉素高度耐药。根据已报道的链霉素耐药基因序列设计引物,从鸡杆菌的质粒上扩增到了耐药基因StrA、StrB和aadA,表明鸡杆菌对链霉素的耐药性是由StrA、StrB和aadA编码的链霉素钝化酶引起;根据已报道的磺胺类药物的耐药基因序列设计引物,从鸡杆菌的质粒上扩增到了耐药基因SulI和SulII,表明鸡杆菌对磺胺的耐药性是由SulI和SulII基因编码对磺胺具有低亲和力的二氢碟酸脱氢酶引起。由于鸡杆菌的链霉素和磺胺类药物耐药基因存在于质粒上,而质粒可导致耐药性的迅速传播,因此从基因机制方面解释了鸡杆菌对链霉素和磺胺具有较高耐药率的原因。利用扩增嗜血杆菌和巴氏杆菌氟喹诺酮类药物耐药决定区的简并引物成功扩增到了鸡杆菌的gyrA和parC的部分基因片段,对这两个基因核苷酸和氨基酸序列进行分析,表明分离的鸡杆菌为巴氏杆菌科的一个属,并且通过gyrA和parC基因QRDR的核苷酸和氨基酸序列进行比对分析,表明鸡杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药性是由于gyrA基因的131位突变导致的氨基酸的改变(Ser→Phe或Tyr)和parC基因的124位突变导致的氨基酸的改变(Ser→Ile)引起的。在对单一PCR扩增条件进行优化的基础上,建立了鸡杆菌链霉素耐药基因(StrA、StrB和aadA)的三重PCR检测方法和磺胺类药物耐药基因(SulI和SulII)的二重PCR检测方法。经过特异性、敏感性、重复性和应用性试验,表明所建立的这两种方法快速、灵敏、特异,为鸡杆菌对链霉素和磺胺类药物的耐药性和耐药基因的快速检测提供了方法,同时也为鸡杆菌对这两种药物的耐药性进行分子流行病学调查提供了新的手段。

全文目录

致谢  5-7
中文摘要  7-8
文献综述  8-17
试验一鸡杆菌地方分离株的耐药性调查分析  17-20
  1 材料与方法  17-18
  2 结果  18-19
  3 讨论  19-20
试验二质粒介导的鸡杆菌对链霉素和磺胺耐药基因的研究  20-33
  1 材料与方法  20-22
  2 结果  22-32
  3 讨论  32-33
试验三鸡杆菌对氟喹诺酮类药物耐药性与gyrA 和parC 基因突变的关系研究  33-42
  1 材料与方法  33-34
  2 结果  34-41
  3 讨论  41-42
试验四鸡杆菌链霉素耐药基因三重 PCR 检测方法的建立与应用  42-52
  1 材料与方法  42-44
  2 结果  44-50
  3 讨论  50-52
试验五鸡杆菌磺胺类药物耐药基因二重PCR 检测方法的建立与应用  52-60
  1 材料与方法  52-53
  2 结果  53-58
  3 讨论  58-60
参考文献  60-69
英文摘要  69-71
附录  71

鸡杆菌地方分离株耐药性及耐药基因的研究

内容摘要

全文目录

相似论文