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c-kit和PI3K（p110α）在实验性隐睾分化型A型精原细胞中的表达及意义

作　者: 唐修俊
导　师: 王达利
学　校: 遵义医学院
专　业: 整形外科
关键词: 体腔温度 精原细胞 c-kit PI3K(P110α) 细胞周期
分类号: R697.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的：通过检测SD大鼠实验性隐睾分化型A型精原细胞c-kit和PI3K(P110α)的mRNA及蛋白的表达以及分化型A型精原细胞细胞周期的变化,初探温度变化对分化型A型精原细胞SCF/c-kit通路中c-kit基因及下游信号PI3K (P110α)及细胞周期的影响。方法：以SD雄性育龄期大鼠作为实验动物,分为正常对照组(不作任何处理)和实验组(双侧腹腔隐睾模型)。在建模后1-3周末,在各时点分别采用SP免疫组化法观察体腔温度作用于睾丸分化型A型精原细胞的影响情况,应用逆转录-多聚酶链反应(Reverse transcription Polymerase chain reaction, RT-PCR)技术和蛋白电泳(Western blot)检测各时点分化型A型精原细胞c-kit和PI3K (P110α)的mRNA及蛋白表达水平；用流式细胞仪(Flow Cytometry, FCM)检测各时点分化型A型精原细胞的细胞周期。结果：免疫组化显示：C-kit在正常生精小管近基膜的分化型精原细胞呈强阳性,染成呈棕黄色；其他细胞(精母细胞、精子顶体)呈弱阳性或阴性,染成呈浅黄色或不着色。不加一抗的空白对照组细胞均呈阴性,不着色。实验组随着时间的延长生精细胞越来越少,最后变成单层精原细胞,精原细胞呈强阳性,染成呈棕黄色,曲细精管管壁变薄弯曲皱缩,管腔变大,间质变少。RT-PCR和Western blot结果显示：1.实验组c-kit的mRNA及蛋白在第一周中高表达,随着时间延长呈降低趋势,但均高于正常对照组；实验组c-kit mRNA在第一、二、三周组分别和正常组比较有统计学差异性(P<0.05)；第一周与二、三周相比均有统计学差异性(P<0.05),第二周与三周组比较无统计学差异性(P>0.05)；c-kit蛋白在第一、二周分别和正常对照组比较有统计学差异性(P<0.05);第一、二、三周组内比较均有统计学差异性(P<0.05),第三周和正常对照组比较无统计学差异性(P>0.05)；2.实验组PI3K (P110α)的mRNA及蛋白在第一周中高表达,随着时间延长呈降低趋势,实验组PI3K (P110α) mRNA在第一、二、三周组分别和正常对照组比较有统计学差异性(P<0.05)；第一、二、三周组内比较均有统计学差异性(P<0.05); PI3K (P110α)蛋白表达：正常对照组分别与一周组、二周组比较有统计学意义(P<0.05)；第一周、二周、三周组组内相互比较均有统计学差异性(P<0.05)。第三周组与正常对照组比较无统计学差异性(P>0.05)。细胞周期结果：实验组G0/G1、S期、G2/M期与正常对照组G0/G1、S期、G2/M期相比较均无统计学差异性(P>0.05),S期、G2/M期所占比例随时间延长无上升趋势。结论：SCF/c-kit及下游信号PI3KP (P110α)增殖系统增殖信号增强,说明温度升高引起生精障碍可能不是通过SCF/C-KIT增殖通路引起的。

全文目录


目录  3-4
英汉缩略词对照表  4-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-12
材料与方法  12-42
讨论  42-46
结论  46-47
参考文献  47-52
原癌基因c-kit在生精细胞中的表达及意义(综述)  52-57
综述参考文献  57-61
发表文章  61-63
致谢  63-64
附图  64-66

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 泌尿科学（泌尿生殖系疾病） > 男性生殖器疾病 > 阴囊及其内容物疾病
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