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Cathepsin L活性对胶质瘤干细胞放射增敏的研究

作　者: 郑冰心
导　师: 梁中琴
学　校: 苏州大学
专　业: 药理学
关键词: X射线 GSCs Cathepsin L 细胞周期凋亡
分类号: R739.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:研究在X射线照射后胶质瘤干细胞(glioma stem cells ,GSCs)中溶酶体组织蛋白酶L(Cathepsin L)活性的变化及其与凋亡和细胞周期的相关性,探讨Cathepsin L活性对胶质瘤干细胞放射敏感性的影响。方法:利用已经建立的人脑胶质瘤干细胞(GSCs)体外培养体系,用适当剂量的Cathepsin L抑制剂Z-FY-DMK处理细胞,再给予不同剂量的X射线照射,用克隆形成法测定细胞活性; Hoechst 33258荧光染色和吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡;单细胞凝胶电泳法观察DNA损伤修复情况;流式细胞仪检测细胞周期的变化; Western blot分析Cathepsin L及凋亡相关蛋白和细胞周期蛋白表达的变化;免疫组织化学观察人脑胶质瘤和正常脑组织中Cathepsin L和CUTL1的表达情况。结果:与单独处理相比,细胞联合处理(Z-FY-DMK处理后再经X射线照射)后,克隆形成法显示其增殖率和克隆形成率明显降低;Hoechst 33258荧光染色和吖啶橙荧光染色结果表明细胞凋亡率显著增加;单细胞凝胶电泳结果显示DNA损伤修复能力减弱;流式细胞仪和Western Blot结果表明,X射线照射后细胞周期阻滞在G2期,而联合处理组阻滞去除;免疫组化可见人脑胶质瘤组织中Cathepsin L和CUTL1高表达,而正常脑组织中低表达或不表达;结论:X射线能抑制GSCs的生长,并诱导其发生细胞周期阻滞和凋亡,用Z-FY-DMK预先处理再用X射线照射后细胞周期阻滞去除,凋亡率增加。本研究结果提示Cathepsin L通过调节细胞周期和促进凋亡来增加GSCs的放射敏感性。

全文目录

中文摘要  4-5
Abstract  5-7
序言  7-12
第一部分 Cathepsin L 活性在X 射线诱导的SU2 凋亡中的作用  12-29
  材料与方法  12-20
  实验结果  20-28
  小结  28-29
第二部分 Cathepsin L 活性在X 射线诱导的SU2 细胞周期阻滞中的作用  29-35
  材料与方法  29-30
  实验结果  30-34
  小结  34-35
结论  35-36
讨论  36-40
参考文献  40-44
附录  44-45
攻读学位期间发表的论文  45-46
致谢  46-47

Cathepsin L活性对胶质瘤干细胞放射增敏的研究

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