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醋酸棉酚对小鼠黄体细胞凋亡的影响
作 者: 倪鸣
导 师: 袁慧
学 校: 湖南农业大学
专 业: 临床兽医
关键词: 醋酸棉酚 黄体细胞 凋亡 基因
分类号: R114
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 6次
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内容摘要
研究目的:为了探讨醋酸棉酚对小鼠黄体细胞凋亡的影响,进一步阐明其作用机理,在理论为醋酸棉酚对雌性动物生殖系统影响给予补充,为今后的研究提供理论依据。研究方法:将25-30日龄昆明系雌性小鼠80只,称重后随机分为5组,分别为空白对照组,乙醇对照组,染毒低(1.6mg/L)、中(8mg/L)、高(40mg/L)剂量组,每组16只。取卵巢黄体进行以下研究:黄体组织切片的观察,卵巢黄体MDA含量和SOD活性及血液中孕激素的含量的测定,Tunel法检测小鼠卵巢黄体细胞凋亡情况,RT-PCR法测定BCL-2,Bax基因和P53蛋白表达。研究结果:醋酸棉酚可以直接杀伤小鼠黄体细胞,产生明显细胞毒性且这种作用呈正相关性;SOD活性与孕激素的含量随着棉酚剂量的增高而降低,其中高剂量组孕激素的含量明显低于对照组的含量差异极显著(P<0.01)。而MDA含量变化趋势是随着醋酸含量的增高而上升的,其高剂量组与对照组比较也差异极显著(P<0.01)。各染毒组小鼠的卵巢黄体细胞凋亡率明显升高,与对照组相比差异极显著(P<0.01)。半定量RT-PCR法测定的Bax基因和P53基因的表达水平明显上升,高剂量组与对照组比差异极显著(P<0.01);Bcl-2基因的表达水平明显下降,其高剂量组与对照组相比差异极显著(P<0.01)。研究结论:1醋酸棉酚作为一种细胞毒素对小鼠黄体细胞有明显的损害作用。2醋酸棉酚能使小鼠黄体组织中SOD活性降低及MDA含量上升,并且使小鼠黄体期血液中孕激素含量降低。3醋酸棉酚能有效的诱导黄体细胞发生凋亡,并且随棉酚剂量的增加,整个黄体组织结构疏松,组织不完整,说明棉酚能诱导其凋亡具有量效关系。4醋酸棉酚能使促进凋亡基因Bax和P53的表达量升高,而使抑制凋亡基因Bcl-2的表达降低。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-9 前言 9-20 一 研究背景 9 二 棉酚的毒性毒理介绍 9-19 三 研究目的和意义 19-20 材料与方法 20-33 1 设备 20-24 1.1 主要仪器设备 20 1.2 实验动物 20 1.3 主要试剂 20-22 1.4 试剂配制 22-24 2 方法 24 2.1 动物分组及染毒 24 2.2 动物处理 24 3 试验指标的测定 24-33 3.1 醋酸棉酚对小鼠黄体病理组织学检查 24-25 3.2 小鼠黄体组织中SOD活性和MDA含量的测定 25-27 3.3 小鼠血清中孕激素含量的测定 27-28 3.4 TUNEL法检测卵巢黄体细胞凋亡 28-29 3.5 RT-PCR半定量法检测基因Bax Bcl-2及P53的表达 29-33 结果与分析 33-40 1 小鼠卵巢黄体组织切片结果 33-34 2 醋酸棉酚对小鼠黄体细胞MDA含量和SOD活性及血液中孕激素的影响 34-35 3 Tunel法检测醋酸棉酚对小鼠卵巢黄体细胞凋亡 35-37 4 运用RT-PCR方法检测凋亡基因Bax、BCL-2及P53的表达结果 37-40 讨论 40-45 结论 45 创新点 45-46 参考文献 46-56 英文缩写词 56-57 致谢 57-58 作者简介 58
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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
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