学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

双氢青蒿素靶向调控Mcl-1表达并诱导胆管癌细胞凋亡的机制研究

作　者: 胡惠
导　师: 龚建平
学　校: 重庆医科大学
专　业: 外科学
关键词: 胆管癌 QBC939 双氢青蒿素 凋亡 Mcl-1 microRNA
分类号: R735.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 13次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


双氢青蒿素（Dihydroartemisinin, DHA）是青蒿素众多衍生物中的一种,拥有着比青蒿素更好的活性，近年来研究表明DHA具有明显抑制肿瘤生长的作用。胆管癌细胞中抗凋亡蛋白Mcl-1(Mcl-1L)成高表达状态，表明胆管癌的发生与Mcl-1的表达失调密切相关。Mcl-1L的mRNA前体经过可变剪接产生截短体Mcl-1S，是一种凋亡控制蛋白，可诱导细胞凋亡。miR-29b表达水平同胆管癌细胞中Mcl-1表达情况密切相关。目的：观察DHA对人胆管癌细胞QBC939是否有确切的诱导凋亡作用，验证凋亡发生是否与转铁蛋白受体（TfR）变化有关，探讨DHA对McL-1表达的影响及其可能机制。方法： MTT及苔盼蓝染色分别检测不同浓度和时间DHA对QBC939抑制率及死亡率的变化影响，并得出最适浓度及作用时间点，以继续以下实验；DNA Ladder及流式细胞术（FCM）检测DHA处理后QBC939凋亡率的变化情况；荧光实时定量PCR（RT-QF-PCR）检测DHA处理后QBC939细胞内TfR、Mcl-1(Mcl-1L，Mcl-1S)相应mRNA以及miR-29b表达及变化情况；Western blot检测TfR以及Mcl-1(Mcl-1L,Mcl-1S)蛋白表达及变化情况。结果： MTT及苔盼蓝染色显示，与对照组相比，实验组DHA可显著抑制QBC939的增殖（P<0.05）并促进其死亡率的增加（P<0.05），两实验均呈时间剂量依赖性，实验证实20μmol/L的DHA在12、24、48h时间段作用效果较明显，且并不会出现大量的死亡细胞影响后续实验指标检查；DNA Ladder及FCM检测表明QBC939凋亡率均显著高于对照组（P<0.01），且呈时间依赖性。同时FCM检测DHA作用后可使QBC939细胞的G0/G1期、G2/M期的细胞减少，细胞被大量阻滞于S期（P<0.01），并诱导部分QBC939发生细胞凋亡；RT-QF-PCR及Western blot检测结果显示，DHA能明显上调QBC939的Mcl-1S、TfR的mRNA和蛋白表达（P<0.01），miR-29b在DHA作用后48h时表达显著增多(P<0.01)，Mcl-1L虽在DHA作用后24h开始表达显著升高，但由于Mcl-1S表达增高远超过Mcl-1L，导致Mcl-1L所占Mcl-1比例显著降低。结论： DHA有确切的诱导QBC939细胞凋亡的作用；DHA并非通过降低TfR表达诱导QBC939细胞凋亡，TfR表达的增高可间接促进胞内钙离子含量的增多，从而增强QBC939细胞对DHA的敏感性；DHA可通过多重机制影响凋亡相关蛋白Mcl-l蛋白的表达，提高Mcl-1S在Mcl-1中表达比例并诱导胆管癌细胞发生凋亡; DHA促进Mcl-1S的表达可能是通过上调miR-29b表达途径完成。

全文目录


英汉缩略语名词对照  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-12
前言  12-13
1.材料  13-15
2.方法  15-23
3.结果  23-31
4.讨论  31-35
全文总结  35-36
参考文献  36-39
文献综述  39-46
  参考文献  44-46
致谢  46-47
攻读硕士研究生期间的科研成果及发表的论文  47-48

相似论文

  1. 多样性密度学习算法的研究与应用,TP181
  2. 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
  3. CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
  4. 塞来昔布与β-榄香烯联合给药的抗肿瘤作用及其机制研究,R96
  5. TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
  6. 水稻胁迫应答基因3’UTR模体及相关miRNA的生物信息学研究,Q943.2
  7. 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
  8. 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子甘油醛-3-磷酸脱氢酶的影响,S858.31
  9. PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞钙信号的影响及其机理初探,S858.28
  10. 血管生成调节因子对性成熟小鼠卵泡及其血管发育的影响,S852.2
  11. β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
  12. 伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1联合诱导Vero细胞凋亡的研究,S856.9
  13. 黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导锦鲤原代肝细胞凋亡机制的初步研究,S856.9
  14. 蛋内注射leptin对肉鸡肝脏胆固醇代谢相关基因及microRNA表达的影响,S831
  15. 沉默BMPR-IB基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡及BMP通路相关基因表达的影响,S828
  16. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
  17. Foxol对小鼠颗粒细胞凋亡的影响,S865.13
  18. 蜂毒素对人肝癌HepG-2细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用及部分机制研究,R735.7
  19. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  20. WWOX在胆管癌组织中的表达及其对胆管癌细胞生物学行为的影响,R735.8
  21. 18氟—氟代脱氧葡萄糖诱导Eca-109食管癌细胞凋亡的初步研究,R735.1

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胆囊、胆道肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com