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非生物胁迫下SIBADH基因在辽宁碱蓬和转pB-BADH烟草中的表达特性分析

作　者: 张寅寅
导　师: 李秋莉
学　校: 辽宁师范大学
专　业: 植物学
关键词: 非生物胁迫基因表达 BADH 辽宁碱蓬转pB-BADH烟草
分类号: Q943.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

非生物胁迫严重影响植物的生长和作物的产量。甜菜碱是一种小分子渗透调节物质，能保护植物抵抗非生物胁迫。甜菜碱醛脱氢酶（BADH）是甜菜碱合成的关键酶，了解BADH基因在植物中的表达特性对研究植物的抗逆性有着重要的作用。本研究通过半定量RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR技术，分析在盐、低温、干旱、ABA胁迫处理下，SlBADH基因在辽宁碱蓬（Suaeda liaotungensis K.）和转pB-BADH（SlBADH启动子驱动SlBADH基因）烟草不同器官中的表达特性，主要结果及结论如下：1. SlBADH基因在辽宁碱蓬叶、茎、根中均有表达，在叶中的表达量远高于其在茎、根中的表达；SlBADH基因在辽宁碱蓬叶、茎、根中的表达均受盐、低温胁迫诱导，但仅在根中的表达受干旱胁迫诱导；ABA处理后，SlBADH基因在辽宁碱蓬叶、茎、根中的表达量均下降，SlBADH基因在辽宁碱蓬中的表达是ABA非依赖型的。2. SlBADH基因在转pB-BADH烟草的叶、茎、根中均有表达，在叶中的表达量远高于其在茎、根中的表达。SlBADH基因在转pB-BADH烟草叶、茎、根中的表达均受盐胁迫诱导，但仅在茎中的表达受干旱、ABA胁迫诱导。3.盐胁迫条件下SlBADH基因在转pB-BADH烟草叶、茎、根中的表达模式与其在辽宁碱蓬中的表达模式类似。SlBADH启动子可能只含有盐胁迫诱导元件，而没有低温、干旱和ABA胁迫诱导元件，可作为一个盐诱导启动子用于植物抗盐基因工程。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
1 文献综述  9-19
  1.1 非生物胁迫  9-11
    1.1.1 盐胁迫  9-10
    1.1.2 干旱胁迫  10
    1.1.3 低温胁迫  10-11
    1.1.4 植物胁迫激素——脱落酸  11
  1.2 基因的表达方式  11-13
    1.2.1 组成型表达  11-12
    1.2.2 诱导型表达  12
    1.2.3 组织特异性表达  12-13
  1.3 基因表达的检测方法  13-15
    1.3.1 转录水平检测  13-14
    1.3.2 翻译水平检测  14-15
    1.3.3 直接检测  15
  1.4 BADH 基因  15-16
    1.4.1 BADH 基因及其表达特性  15-16
    1.4.2 BADH 启动子及其功能  16
  1.5 辽宁碱蓬和转 pB-BADH 基因烟草  16-18
  1.6 本研究的目的及意义  18-19
2 SlBADH 基因在辽宁碱蓬中的表达特性分析  19-34
  2.1 实验材料  19-20
    2.1.1 植物材料  19
    2.1.2 试剂  19
    2.1.3 引物  19
    2.1.4 仪器设备  19-20
  2.2 实验方法  20-24
    2.2.1 辽宁碱蓬的培养  20
    2.2.2 非生物胁迫处理  20
    2.2.3 SlBADH 基因在辽宁碱蓬中的表达  20-24
  2.3 实验结果  24-32
    2.3.1 总 RNA 提取  24-25
    2.3.2 非胁迫条件下 SlBADH 基因在辽宁碱蓬中的表达  25
    2.3.3 盐胁迫下 SlBADH 基因在辽宁碱蓬中的表达  25-27
    2.3.4 4℃低温胁迫下 SlBADH 基因在辽宁碱蓬中的表达  27-29
    2.3.5 干旱胁迫下 SlBADH 基因在辽宁碱蓬中的表达  29-31
    2.3.6 ABA 胁迫下 SlBADH 基因在辽宁碱蓬中的表达  31-32
  2.4 讨论  32-33
    2.4.1 BADH 基因在植物不同器官中的表达  32-33
    2.4.2 BADH 基因在盐、干旱、低温胁迫下的表达  33
    2.4.3 BADH 基因在 ABA 诱导下的表达  33
  2.5 小结  33-34
3 SlBADH 基因在转 pB-BADH 烟草中的表达特性分析  34-46
  3.1 实验材料  34
    3.1.1 植物材料  34
    3.1.2 试剂  34
    3.1.3 培养基  34
    3.1.4 仪器设备  34
  3.2 实验方法  34-36
    3.2.1 转 pB-BADH 烟草组培及液体培养  34
    3.2.2 非生物胁迫处理  34-35
    3.2.3 转 pB-BADH 烟草中 BADH 基因表达特性分析  35-36
  3.3 实验结果  36-45
    3.3.1 总 RNA 提取  36-37
    3.3.2 总 RNA 纯度及浓度测定  37
    3.3.3 非胁迫条件下 SlBADH 基因在转 pB-BADH 烟草中的表达  37-38
    3.3.4 盐胁迫下 SlBADH 基因在转 pB-BADH 烟草中的表达  38-40
    3.3.5 4℃低温胁迫下 SlBADH 基因在转 pB-BADH 基因烟草中的表达  40-41
    3.3.6 干旱胁迫下 SlBADH 基因在转 pB-BADH 烟草中的表达  41-43
    3.3.7 ABA 胁迫下 SlBADH 基因在转 pB-BADH 烟草中的表达  43-45
  3.4 讨论  45
  3.5 小结  45-46
4 结论及展望  46-47
  4.1 主要结论  46
  4.2 展望  46-47
参考文献  47-51
附录 A SlBADH 基因序列  51-53
附录 B SlBADH 基因启动子（pB:-300～+1bp）序列  53-54
附录 C MS 培养基配方  54-55
附录 D DL2000 DNA Maker  55-56
附录 E Slβ-actin 基因序列  56-57
附录 F Ntβ-actin 基因序列  57-58
致谢  58

非生物胁迫下SIBADH基因在辽宁碱蓬和转pB-BADH烟草中的表达特性分析

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