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叶酸对柯萨奇病毒B3诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响

作　者: 王晓琼
导　师: 仇小强
学　校: 桂林医学院
专　业: 心血管内科
关键词: 叶酸柯萨奇B3病毒心脏发育细胞凋亡先天性心脏病
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 22次
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内容摘要

目的:探讨叶酸对柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因与蛋白表达变化的影响。方法:取成熟健康雌性Wistar大鼠随机分为四组:正常对照组;叶酸组;柯萨奇B3病毒组;叶酸对柯萨奇B3病毒感染干预组。各组大鼠与成熟雄性大鼠置于交配笼中1∶1合笼。对照组大鼠自由进水和食物;叶酸组大鼠用补充叶酸的饲料喂养;柯萨奇病毒B3组大鼠用柯萨奇B3病毒腹腔注射持续5天;柯萨奇病毒+叶酸组,用补充叶酸的饲料喂养,柯萨奇B3病毒腹腔注射5天。待自然分娩后取乳鼠心脏,液氮保存检测备用。制作心肌细胞病理切片观察乳鼠心肌损伤;tunel法检测乳鼠心肌凋亡细胞;Western blot及RT-PCR测定乳鼠心肌细胞凋亡相关蛋白(Bax,Bcl-2,Caspase-3)及基因表达。结果:纳入实验大鼠40只,其中病毒组死亡3只,1只中途流产,1只所产乳鼠中有2只为死胎,病毒加叶酸组死亡1只,35只母鼠所产的乳鼠进入结果分析。怀孕大鼠注射柯萨奇病毒后乳鼠心肌细胞损伤明显,光镜可见心肌细胞崩解、断裂;tunel法可见凋亡细胞增加,加用叶酸后状态改善。病毒组乳鼠心肌细胞Bax,Caspase-3蛋白及基因的表达高于叶酸+病毒组(P<0.05);叶酸+病毒组Bcl-2蛋白及基因的表达高于病毒组(P<0.01)。结论:早期怀孕母鼠感染柯萨奇病毒B3后可导致乳鼠心肌细胞损伤明显及凋亡增加,补充叶酸对乳鼠心肌细胞凋亡具有明显的预防作用,其作用机制通过上调凋亡抑制基因Bcl-2蛋白及基因的表达、降低促凋亡基因Bax,Caspase-3蛋白及基因的表达,有效的保护乳鼠心肌细胞。

全文目录

中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
英汉缩略词对照表  9-10
前言  10-11
1 材料与方法  11-20
  1.1 实验材料  11
  1.2 实验试剂和药物  11-12
  1.3 实验仪器  12
  1.4 实验方法  12-19
  1.5 统计学处理  19-20
2 结果  20-25
  2.1 病毒毒力测定结果  20
  2.2 模型制备结果及乳鼠心肌细胞病理变化  20-21
  2.3 心肌细胞凋亡阳性率  21-22
  2.4 乳鼠心肌细胞凋亡相关（Bax、Bcl-2、Caspase-3）蛋白表达  22-23
  2.5 乳鼠心肌心包凋亡相关基因mRNA 的表达  23-25
3 讨论  25-30
4 结论  30-31
参考文献  31-33
综述1  33-42
  参考文献  39-42
综述2  42-53
  参考文献  48-53
攻读硕士学位期间发表论文  53-54
致谢  54-55

叶酸对柯萨奇病毒B3诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响

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