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抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊复方皂苷对病毒性心肌炎小鼠的治疗作用

作　者: 姚荣妹
导　师: 包巨太
学　校: 河北联合大学
专　业: 中医内科学
关键词: 病毒性心肌炎柯萨奇B3病毒复方提取物心肌保护
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的本研究用柯萨奇B₃型病毒（coxsackievirus B₃,CVB₃）腹腔注射雄性Balb/c小鼠,制备病毒性心肌炎（viral myocarditis, VMC）模型,观察抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊复方提取物皂苷（anti-CVB myocarditis capsule extractive saponins,A-CVB-MC-S）对VMC小鼠的心肌保护作用,并探讨其可能机制。方法1.动物模型建立选用雄性Balb/c小鼠,适应性饲养一周后,随机取25只作为正常对照组（Normal control group,N）,腹腔注射0.2ml未经稀释的Hep-2细胞冻融液。其余小鼠分别腹腔注射0.8ID₅₀的CVB₃病毒,0.2ml/只,建立VMC模型。被CVB₃感染而诱发心肌炎的小鼠出现消瘦、皮毛稀疏无光泽、活动减少、食欲减退、颤抖等一系列症状,血清心肌酶活力升高及心肌病理改变作为造模成功指标。2.实验方案选取小鼠150只,随机分成6组:正常对照组、模型组（Model group,M）、西药对照组（病毒唑:Ribavirin group,R;50mg/kg）、皂苷高剂量组（Saponins high dose group,SH;0.18g/kg）、皂苷中剂量组（Saponins medium dose group,SM;0.09g/kg）、皂苷低剂量组（Saponins low dose group,SL; 0.045g/kg）,每组25只。N组和M组蒸馏水灌胃,其余组灌服相应的药物,各组均在腹腔注射后2小时开始灌胃,各组均每日给药1次,连续14d,容积均为20ml·kg^-1。建立小鼠宏观体征表,每天观察一次并记录各组小鼠体重、死亡情况、皮毛色泽形态、进食及活动情况等生存状况,于第8d各组分别取8只、15d将剩余小鼠,眼眶取血制备血清,进行心肌酶和肌钙蛋白I （cardiac troponin I ,cTnI ）检测。然后颈部脱臼处死,无菌摘取心脏、脾和胸腺,迅速称重,计算各脏器的湿重指数,心脏做常规病理切片,光镜下观察心肌组织的病理变化。结果1. A-CVB-MC-S对各组小鼠整体状态、体重及死亡率的影响在造模后第3天,除N组外,其余各组均有小鼠出现背毛杂乱,无光泽,蜷缩驼背,活动减少,对刺激反应淡漠、相互撕咬、体重渐轻等病态表现。在实验的第7天,M组、R组小鼠出现烂耳,尾部有出血点甚至溃烂及部分小鼠脚部水肿或出血点等病变,皂苷各剂量组未见该病态。实验前期各病毒组小鼠体重下降明显。至实验的第7天M组小鼠体重明显低于N组,其余给药组状态稍好。虽然实验过程中各病毒组体重渐轻,但皂苷各剂量组小鼠处死前出现体重缓慢增长趋势实验至第3天有小鼠死亡,死亡高峰发生在第5-8天,皂苷各剂量组均能减少小鼠死亡率,尤其是SM组疗效最佳。2. A-CVB-MC-S对各组小鼠心、脾、胸腺湿重指数的影响结果显示,与N组相比,M组及各治疗组心脏、脾、胸腺湿重量指数均增加,并且M组与N组差异显著P<0.01。给药后,各治疗组小鼠上述指标都有下降趋势,在实验的第8天,R组、SH、SM组心重指数下降明显,与M组比较有显著差异;脾重指数SM组效果最佳,与模型组比较有差异P<0.05;胸腺指数各治疗组差异不明显,且与正常组比较有显著差异。实验的第15天,R组、SH组、SM组心重指数与M组相比差异显著P<0.01;脾和胸腺指数各治疗组与M组比较差异不明显,但实验数据显示,各治疗组小鼠脏器指数均有下降趋势。三种脏器指数尤以心重指数下降最为明显。3. A-CVB-MC-S对心肌炎小鼠血清心肌酶AST、CK、CK-MB、LDH及HBDH的活性的影响感染病毒后,小鼠血清中AST、CK、LDH、CK-MB及HBDH含量均升高。与M组比较,各给药组的上述指标活性明显下降。从两次的检测结果显示各种药物降低心肌酶作用强度由高到低的顺序为:SM>SH>R>SL组,其中SM、SH组降低LDH、CK、CK-MB水平疗效显著,与M组比较P<0.05。4. A-CVB-MC-S对各组小鼠cTnI的影响N组小鼠血清cTnl水平极微量,在造模后第8天,M组和各治疗组血清cTnl水平明显升高,各治疗组cTnl水平均低于M组（P<0.05）。在15天时,M组小鼠血清cTnl含量下降,与各治疗组相比无明显差异。5. A-CVB-MC-S对各组小鼠心肌病理改变的影响镜下见N组小鼠心肌组织形态结构正常,无炎细胞浸润、细胞无变性坏死等病理改变。其余组小鼠心肌均有不同程度病变,目检下M、R组小鼠心脏表面出现脂肪样乳白色病变,光镜下可见心肌细胞排列紊、肿胀、变性坏死和大量的炎性细胞浸润,特别是小血管周围炎性反应更明显。用药后各治疗组小鼠心肌炎性和坏死等病理改变均明显轻于模型组。病理积分评定结果示,M组病理积分显著高于各治疗组,两者比较有统计学差异P<0.05。结论A-CVB-MC-S可以明显改善VMC小鼠症状,提高小鼠的生存率,对VMC小鼠有保护作用,可以降低心肌炎小鼠心肌酶活性和cTnI含量,减轻心肌细胞损伤,并且可以降低心肌炎小鼠心重指数,改善心肌病理改变,减少心肌组织病理积分,对心肌有很好的保护作用。

全文目录

中文摘要  5-8
ABSTRACT  8-12
英文缩略表  12-14
前言  14-16
材料与方法  16-22
结果  22-31
讨论  31-36
小结  36-37
参考文献  37-40
实验附图  40-42
综述中药治疗柯萨奇B病毒性心肌炎的研究进展  42-49
  参考文献  47-49
致谢  49-50
个人简历  50-51

抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊复方皂苷对病毒性心肌炎小鼠的治疗作用

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