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Annexin 5对疼痛应激模型鼠生殖功能的保护作用及机制研究
作 者: 林钗英
导 师: 姚兵
学 校: 南京师范大学
专 业: 发育生物学
关键词: annexin 5 睾酮 应激 3β-羟基类固醇脱氢酶 凋亡
分类号: R965
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
膜联蛋白(Annexin)是一种—钙离子依赖的方式与负离子磷脂结合的蛋白家族,在从真菌到高级脊椎动物的超过65个物种中总共鉴定出160多种独特的膜联蛋白。其中膜联蛋白5(annexin 5,A5)是膜联蛋白家族成员中含量最丰富的蛋白,约占细胞总蛋白的1%,其分子量约36kD。已有研究表明annexin 5具有多种功能,如抗凝血、具有钙离子通道活性、抑制磷脂酶A2和蛋白激酶C的活性,可能参与胞吞和胞吐作用等。Kawaminami等研究发现annexin 5存在于大鼠的甲状腺、肾上腺、卵巢、睾丸等内分泌器官,并呈细胞特异性分布。应激(stress)是机体对内外环境剧变刺激作出的包括精神、神经、内分泌和免疫等方面的综合应答状态。由神经损伤引起的病理性神经疼痛是一种持续疼痛,激活下丘脑—垂体—肾上腺皮质(HPA)轴和中枢自律系统。大量研究表明,慢性躯体和心理应激均能抑制或损伤雄性动物的性腺轴功能,延迟男性青春期发育,影响精子生成,甚至造成永久不育。强烈的身心应激尤其是长期慢性应激严重影响着人类的身心健康,导致临床疾病、亚健康状态及早衰。目前认为慢性疲劳综合征和抑郁症的发生均与长期应激有关。应激危害生殖内分泌功能的事实,早已得到国外学者的广泛认同。本实验室先前的研究发现,慢性疼痛应激大鼠睾丸组织中annexin 5 mRNA及蛋白水平表达均显著降低,生殖相关参数下降,同时睾酮分泌也受到抑制;体外实验证实,于大鼠睾丸间质细胞(leydig cell)培养液中加入annexin 5(?)(?)增加间质细胞睾酮的分泌,并且这种刺激作用具有剂量与时间依赖性。进一步的实验证实,ERK1/2 MAPK是annexin 5调控睾酮合成的关键信号通路。提示annexin 5可能是一种重要的生殖内分泌调控因子。为了进一步研究annexin 5在生殖系统中的作用,我们建立了慢性疼痛应激模型—坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury, SNI)模型,探讨annexin 5在由慢性疼痛应激造成的生殖损伤中的保护作用及其机制。本实验共分四大部分:第一部分,用三种不同剂量的annexin 5 (7.5μg/kg、15μg/kg、30μg/kg)腹腔注射正常SD大鼠以确定最适注射剂量。腹腔注射21d后,与对照组(腹腔注射等量的pH8.0 Tris-HCl)相比,15μ/kg实验组大鼠附睾系数与精子相对计数均显著提高(P<0.05);其它剂量组与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。7.5μg/kg组和15μg/kg组大鼠血清睾酮含量显著高于对照组(P<0.01),30μg/kg组大鼠睾酮含量虽也有升高,但与对照组比较,结果无统计学意义(P>0.05)。第二部分:建立SNI模型。实验分为3组:正常对照组、假手术组、模型组。模型组结扎并切断胫神经和腓总神经以建立SNI模型;假手术组只暴露坐骨神经干及其分量来实现的。
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全文目录
摘要 4-6 Abstract 6-8 前言 8-12 参考文献 10-12 第一章 不同剂量的annexin 5对SD大鼠生殖相关指标和睾酮分泌的影响 12-17 1 材料和方法 12-13 2 结果 13-14 3 讨论 14-16 4 参考文献 16-17 第二章 坐骨神经选择性损伤诱导的慢性疼痛模型的建立及行为学观察 17-21 1 材料和方法 17-18 2 结果 18-19 3 讨论 19-20 4 参考文献 20-21 第三章 Annexin 5对慢性疼痛应激大鼠生殖损伤的保护作用 21-28 1 材料和方法 21-22 2 结果 22-24 3 讨论 24-26 4 参考文献 26-28 第四章 Annexin 5对慢性疼痛应激大鼠睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响 28-39 1 材料和方法 28-33 2 结果 33-36 3 讨论 36-38 4 参考文献 38-39 第五章 Annexin 5对慢性疼痛应激大鼠生精细胞凋亡的影响 39-50 1 材料和方法 39-42 2 结果 42-45 3 讨论 45-48 4 参考文献 48-50 全文总结 50-51 附录: 硕士研究生期间论文发表情况 51-52 致谢 52
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学 > 实验药理学
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