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纳米钙补肾中药调节骨质疏松症骨钙代谢作用机制的实验研究

作　者: 何慧明
导　师: 郑洪新
学　校: 辽宁中医学院
专　业: 中医基础理论
关键词: 骨质疏松肾虚 BGP BMP-2 纳米中药基因表达
分类号: R285
类　型: 博士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

本实验研究目的：通过观察纳米钙中药和补肾补钙中药复方对肾虚骨质疏松大鼠各项骨钙代谢指标及对BGP基因和蛋白表达、BMP-2基因和蛋白表达的影响，旨在从骨钙代谢方面探讨骨质疏松症的病理和中药调节机制，并观察纳米中药对钙吸收和沉积的影响。主要研究内容和研究方法：采用超音速气流磨纳米技术制备纳米中药。采用去势法腰背部切除双侧卵巢，建立肾虚骨质疏松大鼠模型。使用NORLAND公司XR-36型双能X线骨密度仪，采用小动物骨密度测定软件，测定大鼠左后肢股骨的骨密度；使用应变测试系统，按股骨拉伸和三点弯曲试验，测定股骨生物力学指标；以等离子体发射光谱法测定腰椎骨骨钙含量；以常规生化法测定血清钙、镁含量及血清酸性磷酸酶含量；以Elisa法测定骨钙素含量。以RT-PCR法检测大鼠右侧股骨骨钙素BGP基因和骨形成蛋白BMP-2基因表达；以Western-blot法检测右侧股骨骨钙素BGP和骨形成蛋白BMP-2蛋白表达。研究结果表明：大鼠去卵巢后体重明显增加、子宫重量明显降低，骨密度、骨钙含量、血清钙离子及镁离子浓度均显著降低，血清骨钙素含量显著降低，血清抗酒石酸酸性磷酸酶含量显著增高，骨生物力学指标和骨生物力学性能明显降低，BGP和BMP-2基因及其蛋白表达明显低于正常组。通过用药，纳米钙能显著提高去卵巢实验大鼠股骨的骨密度值，其效果优于阳性药对照组，也优于纳米钙补肾中药组；但在提高股骨头骨密度方面，纳米钙补肾中药稍优于纳米钙。纳米钙能显著提高去卵巢实验大鼠腰椎骨骨钙含量以及血清钙、镁含量，其效果优于阳性药对照组，也优于纳米钙补肾中药组。我们发现，通过用药能改善和恢复大鼠骨生物力学性能，但各组在治疗效果方面无明显差异。治疗组能提高去卵巢大鼠血清BGP含量和降低血清TRAP值，但治疗组和对照组均未能使二者达到正常组值。纳米钙和纳米钙补肾中药明显促进大鼠骨BGP和BMP-2基因及其蛋白表达，其中以纳米钙组表达最强，纳米钙补肾中药组其次，且呈剂量依赖性。结论：单味中药通过纳米细化后，能明显提高药物的吸收和在体内的沉积，提高药物疗效，其作用可能是通过影响微循环中钙离子浓度，进而影响骨细胞内外BGP和BMP-2基因和蛋白表达水平，从而促进钙的沉积和骨的矿化，抑制骨吸收，促进骨形成。

全文目录

中英文名词术语对照  4-5
英文摘要  5-7
中文摘要  7-8
前言  8-10
实验材料与方法  10-12
  1. 实验动物及分组  10
  2. 肾虚骨质疏松症动物模型建立与评估  10
  3. 纳米钙及其复方的制备  10
  4. 实验药物与给药方法  10
  5. 实验取材  10
  6. 统计学处理  10-12
观察指标及测定方法  12-17
  1. 体重和子宫重量的测定  12
  2. 骨密度(BMD)的测定(DEXA法)  12
  3. 骨生物力学指标测定  12
  4. 骨钙含量测定  12-13
  5. 血钙、镁测定  13
  6. 血清骨钙素(BGP)测定(ELISA法)  13
  7. 血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)测定  13
  8. 骨钙素和骨形成蛋白基因表达(RT-PCR法)  13-14
  9. 骨钙素和骨形成蛋白蛋白表达(Western-blot法)  14-17
结果与分析  17-29
  1. 体重和子宫重量变化的观察  17
  2. 骨密度(BMD)变化的比较  17-19
  3. 骨生物力学指标的比较  19-21
  4. 骨钙含量变化的比较  21-22
  5. 血钙、镁含量的比较  22-24
  6. 血清骨钙素(BGP)含量的比较  24
  7. 血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)变化的观察  24-25
  8. 骨钙素和骨形成蛋白基因表达观察  25-27
  9. 骨钙素和骨形成蛋白蛋白表达观察  27-29
讨论  29-47
  1. 肾虚骨质疏松症动物模型的研究思路和方法  29-30
  2. 肾虚骨质疏松症的研究概况和进展  30-43
  3. 关于钙代谢机制的研究  43-44
  4. 纳米技术及其在生物医学中的应用  44-47
结论  47-48
参考文献  48-51
致谢  51-52
综述  52-64
  参考文献  62-64
个人简历  64

纳米钙补肾中药调节骨质疏松症骨钙代谢作用机制的实验研究

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