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鹿茸多肽增强体外培养兔关节软骨细胞代谢的实验研究

作 者: 李勇
导 师: 王和鸣;彭太平
学 校: 福建中医学院
专 业: 中医骨伤科学
关键词: DNA Ⅱ型胶原 蛋白多糖 细胞凋亡
分类号: R285.5
类 型: 博士论文
年 份: 2003年
下 载: 220次
引 用: 1次
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内容摘要


目的:研究鹿茸多肽对体外培养兔关节软骨细胞代谢的影响。方法:本研究运用先进的现代生物学技术,如细胞体外培养、放射免疫法、同位素示踪法、化学染色法,以及先进的图像处理等方法,在细胞水平研究鹿茸多肽对体外培养的兔关节软骨细胞分裂、增殖、DNA复制、Ⅱ型胶原的合成、蛋白多糖的合成、软骨细胞凋亡等方面的作用及其最佳量效关系。用光镜观察实验组与对照组细胞形态的区别;用MTT法对实验组与对照组关节软骨细胞进行计数,并了解鹿茸多肽对关节软骨细胞增殖的影响;用~3H-TdR示踪,研究鹿茸多肽对关节软骨细胞DNA合成的影响;用~3H-脯氨酸示踪,研究鹿茸多肽对关节软骨细胞Ⅱ型胶原合成的影响;用甲苯胺蓝染色,研究鹿茸多肽对关节软骨细胞蛋白多糖合成的影响;用吖啶橙染色及流式细胞仪计数法,研究鹿茸多肽对关节软骨细胞凋亡的影响。结果:实验组中,软骨细胞生长旺盛,细胞密度明显增大,细胞呈梭形、三角形;中剂量组(0.08%)细胞增殖最明显;小剂量组(0.04%)软骨细胞~3H-TdR及~3H-脯氨酸掺入量最多;实验组蛋白多糖合成显著增加;实验组较对照组细胞凋亡数量减少。结论:鹿茸多肽可明显促进体外培养的关节软骨细胞的DNA、Ⅱ型胶原及蛋白多糖的合成,且对关节软骨细胞的凋亡有一定的拮抗作用,为临床治疗骨性关节炎提供了一个研究方向。

全文目录


中文摘要  4-5
英文摘要  5-6
正文  6-27
  前言  6-9
    研究的意义  6-7
    国内外研究现状  7-9
  材料与方法  9-14
    一 实验动物  9
    二 实验试剂  9-10
    三 实验仪器  10
    四 实验分组  10
    五 实验过程  10-14
  结果与分析  14-18
    一 光镜观察  14
    二 软骨细胞计数  14-15
    三 ~3H-TdR的掺入情况  15-16
    四 ~3H-脯氨酸的掺入情况  16-17
    五 关节软骨蛋白多糖的合成  17
    六 软骨细胞的凋亡  17-18
  讨论  18-22
    一 鹿茸的性状及功效  18-19
    二 关节软骨修复的标志  19
    三 研究方法的确定  19-20
    四 鹿茸多肽有效浓度的确定  20
    五 鹿茸多肽对关节软骨细胞形态的影响  20
    六 鹿茸多肽对关节软骨细胞增殖的影响  20
    七 鹿茸多肽对关节软骨细胞DNA合成的影响  20-21
    八 鹿茸多肽对关节软骨细胞Ⅱ型胶原合成的影响  21
    九 鹿茸多肽对关节软骨细胞蛋白多糖合成的影响  21
    十 鹿茸多肽对关节软骨细胞凋亡的影响  21-22
  小结  22-23
  致谢  23
  参考文献  23-27
附件  27-65
  附件一 实验数据表  27-33
  附件二 实验照片  33-43
  附件三 综述  43-51
  附件四 个人简历  51-52
  附件五 发表论文目录  52-65

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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