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江苏省小麦孢囊线虫的发生调查及其核糖体DNA-ITS序列分析
作 者: 梁中伟
导 师: 李红梅
学 校: 南京农业大学
专 业: 植物病理学
关键词: 小麦禾谷袍囊线虫 分布 核糖体DNA ITS-RFLP 系统发育
分类号: S435.121
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
小麦禾谷孢囊线虫(cereal cyst nematode, CCN)是当前对我国小麦安全生产有较大威胁的植物病原线虫。CCN于1989年在湖北省天门县首次发现,在此后的20年间,陆续在河北、河南、北京、山西、陕西、内蒙古、青海、甘肃、山东和安徽报道有小麦孢囊线虫病的发生,已对我国小麦生产造成了严重的经济损失,而江苏省的小麦种植中CCN的发生情况还未见相关报道。在2009年5月期间,从江苏省徐州、连云港、宿迁、盐城和淮安等5个地区的22个县近60个乡镇的冬小麦田共采集76份含根系和根际土壤的样本,经线虫的分离与鉴定表明,小麦禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae, CCN)在徐州、连云港、宿迁和盐城等地的小麦种植区均有发生,发生率为35%。各地区的CCN发生情况差异较大,其中徐州地区发生最为普遍,平均检出率达67%,并且沛县、丰县、邳州和睢宁等4个县市的小麦禾谷孢囊线虫病发生率超过90%。在病害发生程度上,徐州地区也最为严重,平均孢囊数目达54个/100mL土,其次是盐城地区,平均孢囊数目达37个/100mL土。另外不同地区或同一地区不同采样点之间,群体密度变化大,孢囊的含卵量也差异显著,其中,丰县华山镇、沛县河口镇和丰县城东的田块孢囊密度较大,每100ml土壤的平均孢囊数分别为161、159和112个,每孢囊的平均含卵量分别为187,190和174个。对采集的15个江苏小麦禾谷孢囊线虫群体进行了rDNA-ITS区的RFLP分析表明,测定的所有群体均具有相同的酶切图谱,既具有与国外“B”型群体(印度群体)相同的Alu I和Rsa I酶切图谱,同时也具有中国群体独特的HinfⅠ和Tru9 I酶切图谱(“C”型)。采用Neighbor-Joining法(MEGA4.0)构建的ITS序列系统进化树揭示,所有15个江苏群体均聚在小麦禾谷孢囊线虫组(Heterodera avenae group)下的小麦禾谷孢囊线虫复合种群(H. avenae complex)分支内,且多数江苏群体与草地孢囊线虫(Hpratensis)德国和俄罗斯群体的遗传距离相对较近。通过江苏群体与其他近源群体的ITS序列分析比较,表明江苏省的小麦禾谷孢囊线虫群体和国内其它省份的小麦孢囊线虫群体具有丰富的遗传多样性。
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全文目录
摘要 6-7ABSTRACT 7-9缩略语 9-10上篇 文献综述 10-33 第一章 小麦孢囊线虫病的概述 11-25 1 禾谷孢囊线虫的分类及形态 11-12 1.1 分类 11 1.2 形态特征 11-12 2 小麦孢囊线虫病的分布及危害 12-15 2.1 小麦孢囊线虫病的发生分布 12-14 2.2 小麦孢囊线虫病的症状与危害 14-15 3 禾谷孢囊线虫的侵染过程 15-17 3.1 禾谷孢囊线虫卵的孵化 15-16 3.2 侵染循环 16-17 4 禾谷孢囊线虫的致病型和品种抗病性的研究 17-22 4.1 禾谷孢囊线虫的致病型 17-18 4.2 禾谷孢囊线虫的品种抗病性研究 18-22 5 小麦孢囊线虫病的防治 22-25 5.1 检疫防传 22-23 5.2 农业防治 23-24 5.3 化学防治 24 5.4 生物防治 24-25 第二章 植物病原线虫的分子鉴定方法 25-33 1 蛋白质水平的鉴定 25-26 1.1 同工酶分析 25-26 1.2 等电点聚焦 26 2 DNA水平的鉴定 26-33 2.1 基因组DNA基础上的分析 26-28 2.2 线粒体DNA基础上的鉴定分析 28 2.3 核糖体DNA基础上的鉴定分析 28-33下篇 研究内容 33-57 第一章 江苏省小麦孢囊线虫病发生的初步调查 35-43 1 材料与方法 36-37 1.1 分布调查方法 36 1.2 孢囊分离方法 36-37 1.3 孢囊中卵量统计 37 2 结果 37-41 2.1 小麦孢囊线虫病在小麦灌浆期的田间症状特点 37 2.2 小麦孢囊线虫病在江苏省的发生 37-39 2.3 小麦孢囊线虫病的发生严重程度 39-41 3 讨论 41-43 第二章 江苏省小麦孢囊线虫群体核糖体DNA-ITS区序列分析 43-57 1 材料与方法 44-49 1.1 小麦孢囊线虫群体的采集与分离 44-45 1.2 DNA提取 45-46 1.3 PCR扩增 46 1.4 rDNA-ITS-RFLP 46-47 1.5 PCR产物的克隆、测序和序列分析 47-49 2 结果与分析 49-55 2.1 小麦禾谷孢囊线虫群体rDNA-ITS的PCR扩增结果 49-50 2.2 rDNA-ITS-RFLP分析结果 50-52 2.3 rDNA-ITS-RFLP图谱比较 52 2.4 ITS序列分析 52-55 3 讨论 55-57全文结论 57-59参考文献 59-69致谢 69
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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 禾谷类作物病虫害 > 麦类病虫害 > 病害
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