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清窍益脑汤对Alzheimer病模型大鼠海马神经元细胞凋亡的干预作用

作　者: 杨晨
导　师: 王平
学　校: 湖北中医学院
专　业: 中医基础理论
关键词: 海马神经元 动物模型 细胞凋亡 阿尔茨海默病 bcl-2 bax 清窍益脑汤
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


目的:本论文旨在探讨老年性痴呆脾肾气虚痰阻脑络的发病机理,并通过建立老年性痴呆大鼠多因素复合模型,从神经细胞凋亡和行为学的角度观察清窍益脑汤治疗老年性痴呆的效果与作用机制。方法:1.15月龄雄性Wistar大鼠50只,随机分为五组,即正常组、空白组、模型组、中药组和西药组,每组10只。2.应用脑立体定向技术给大鼠前脑基底核注射鹅膏覃氨酸和Aβ25-35混合液,损毁大鼠前脑基底核,建立老年性痴呆大鼠多因素复合模型。3.脑内注射2周后开始灌胃给药,连续给药28天。4.灌胃28天后分别进行Morris水迷宫行为检测,评价其学习记忆成绩,主要进行定位航行和空间探索实验,记录大鼠平均逃避潜伏期、平均游泳距离、穿越平台的次数与搜索平台变化趋势。5.动物水迷宫实验后断头,取脑,分离出海马区。一部分放入液氮保存,留作细胞凋亡率检测,另一部分放入4%多聚甲醛固定液中固定,常规石蜡包埋,留作细胞免疫组织化学染色法检测。6.细胞免疫组织化学染色法检测bcl-2和bax蛋白水平。7.流式细胞仪检测海马神经元细胞凋亡率。8.综合分析各检测值的意义。结果:1.大鼠平均逃避潜伏期前4天和后2天模型组最长,西药组和中药组均比模型组明显缩短（P＜0.01）,中药组与西药组比较,前4天潜伏期无差别,后2天潜伏期中药组比西药组缩短（P＜0.05）。2.中药组的象限百分比明显升高,与模型组相比有统计学差异（P＜0.01）;其象限百分比、20%区域与西药组无差异（P＞0.05）;40%区域与西药组比较有显著差异（P＜0.01）。3.模型组大鼠空间搜索能力显著下降,其象限百分比较正常组和空白组明显缩短（P＜0.01）;20%、40%区域较正常组和空白组明显增加（P＜0.01）。中药组的象限百分比明显升高,与模型组相比有统计学差异（P＜0.01）;其象限百分比、20%区域与西药组无差异（P＞0.05）;40%区域与西药组比较有显著差异（P＜0.01）。4.模型组大鼠较其它各组大鼠跨过原平台位置次数明显下降,与其它各组相比有显著差异（P＜0.01）。中药组大鼠跨过原平台位置次数明显升高,与模型组相比差异具有统计学意义（P＜0.01）。西药组大鼠跨过原平台位置次数比中药组下降,两者比较有差异（P＜0.05）。5.模型组细胞凋亡率明显比正常组和空白组升高（P＜0.01）。西药组、中药组细胞凋亡率明显比模型组降低（P＜0.01）。中药组细胞凋亡率明显比西药组降低（P＜0.01）。6.模型组大鼠海马神经元bax、bcl-2阳性细胞数显著高于正常组（P＜0.01）。中药组及西药组大鼠海马神经元bax阳性细胞数显著低于模型组（P＜0.01）,bcl-2阳性细胞数显著高于模型组（P＜0.01）。中药组大鼠海马神经元bax阳性细胞数与西药组间无显著性差异（P＞0.05）,bcl-2阳性细胞数显著高于西药组（P＜0.01）。结论:1.脾肾气虚、痰阻脑络是老年性痴呆的基本病机之一,益气化痰法是其有效治法。2.多因素复合模型(IBO+Aβ25-35)更能近似模拟老年性痴呆的行为学和病理学特征,是一种可靠的动物模型。3.清窍益脑汤能明显升高大鼠海马神经元bcl-2阳性细胞数,降低bax阳性细胞数,降低细胞凋亡率,抑制大鼠海马神经元细胞凋亡。4.清窍益脑汤能明显改善大鼠学习记忆能力,对老年性痴呆模型大鼠有明显治疗作用。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
英文缩略语  9-10
前言  10-12
材料和方法  12-16
  1.材料  12-13
  2.方法  13-16
结果  16-20
  1.Morris水迷官实验结果  16-18
  2.清窍益脑汤对模型大鼠海马神经元细胞凋亡率的影响  18
  3.清窍益脑汤对模型大鼠海马神经元bax、bcl-2蛋白水平的影响  18-20
讨论  20-34
  1. 中医对老年性痴呆的认识  20-21
    1.1 古籍文献对老年性痴呆的描述  20-21
    1.2 中医对老年性痴呆病因病机的认识  21
  2. AD动物模型评价  21-23
    2.1 AD动物模型研究现状与评价  21-22
    2.2 多因素复合模型(Aβ_(25-35)5+IBO)特点与评价  22-23
  3. AD与神经细胞凋亡关系探讨  23-25
  4. 清窍益脑汤对AD模型大鼠海马神经元凋亡因子bcl-2、bax的作用  25-26
  5. 清窍益脑汤治疗老年性痴呆理论探讨  26-32
    5.1 老年性痴呆与五脏关系探讨  26-27
    5.2 清窍益脑汤治疗老年性痴呆理论依据  27-29
    5.3 清窍益脑汤治疗老年性痴呆治则探讨  29-30
    5.4 清窍益脑汤组方分析  30-31
    5.5 现代药理研究分析  31-32
  6. 清窍益脑汤对老年性痴呆的干预作用  32-34
结论  34-35
参考文献  35-39
文献综述  39-58
致谢  58

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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