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促性腺激素释放激素激动剂对体外培养子宫肌瘤肌细胞及内膜细胞凋亡的影响

作　者: 王冬昱
导　师: 康佳丽
学　校: 广州医学院
专　业: 妇产科学
关键词: 促性腺激素释放激素 子宫肌瘤 平滑肌细胞 子宫内膜 体外培养 细胞凋亡
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:1.检测体外培养子宫肌瘤(uterine myoma)患者子宫肌瘤细胞及内膜细胞的凋亡变化并研究促性腺激素释放激素激动剂(gonadotropin releasing hormone agonist, GnRHa)对上述两者凋亡的影响。2.探讨子宫肌瘤的发生与细胞凋亡的关系,子宫肌瘤内膜细胞的凋亡变化及其意义,深入研究GnRHa治疗子宫肌瘤的作用机制,为发展更有效安全的临床治疗提供新的思路及实验依据。材料与方法:1.研究对象2008年1月至2009年6月在广州医学院附属广州市第一人民医院妇科住院行子宫肌瘤切除术的有异常子宫出血症状的子宫肌瘤患者36例,月经干净后手术,术后病理检查确诊,术中切除子宫肌瘤取其瘤核标本为研究组A,同时取同一患者子宫肌瘤周围正常平滑肌组织为对照组A;同组患者术前分段诊刮取其宫腔内膜标本为研究组B,其病理结果均提示增殖期内膜,无合并子宫内膜病变,该组患者年龄28～46岁,平均(38.21±2.28)岁。选取同期因卵巢上皮性良性肿瘤行卵巢囊肿剔除术的患者22例,严格除外合并子宫肌瘤、子宫内膜异位症、炎症及恶性肿瘤等其他疾病可能,月经干净后手术,术前患者知情同意情况下分段诊刮取其宫腔内膜标本为对照组B(病理结果同样均提示增殖期内膜),该组患者年龄22～45岁,平均(35.23±3.32)岁。以上患者术前3个月内未服用过激素类药物,无其他内分泌、免疫和代谢疾病。2.实验方法对研究组及对照组所取的细胞样本分别进行体外培养,免疫组化鉴定细胞类型,确定为子宫平滑肌细胞及子宫内膜细胞后分别用GnRHa 10-7 mol/L、10-5 mol/L两种药物浓度作用24、48、72 h三个时间点后联合采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TdT-mediated biotinylated dUTP nick end labeling,TUNEL)及流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI方法检测各组细胞的凋亡率。3.统计学分析本研究结果采用SPSS13.0统计软件处理,组间比较用单因素方差分析,方差齐者用LSD-t法,方差不齐者用Dunnett-t法。以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1、GnRHa作用前,子宫肌瘤细胞(研究组A)凋亡率在各时间点均低于正常子宫平滑肌细胞(对照组A),培养24h时差异无统计学意义(P>0.05),培养48h、72h时差异有统计学意义(P<0.01),而子宫肌瘤内膜细胞(研究组B)凋亡率在各时间点均低于正常子宫内膜细胞(对照组B),差异均有统计学意义(P<0.01),上述各组细胞都随时间的推移凋亡率增加。2、GnRHa作用后,各组细胞的凋亡率不同程度高于作用前,且随作用时间、浓度的增加而增加,具有时间和剂量依赖性,研究组A各时间点、药物浓度细胞凋亡率均超过并高于同时间、药物浓度的对照组A,培养24h时差异无统计学意义(P>0.05),培养48h、72h时差异有统计学意义(P<0.01),研究组B各时间点、药物浓度细胞凋亡率均超过并高于同时间、药物浓度的对照组B,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:1.体外培养子宫肌瘤细胞的凋亡率低于正常子宫平滑肌细胞,提示凋亡调控失衡致凋亡率低可能参与了子宫肌瘤的发生和发展。2.有异常子宫出血症状的子宫肌瘤内膜细胞(无合并子宫内膜病变)的凋亡率低于正常子宫内膜细胞,子宫肌瘤内膜细胞凋亡异常可能是子宫肌瘤的遗传学特性所决定,但同时也可能受子宫肌瘤局部高雌、孕激素水平及各种生长因子的影响。细胞凋亡及其调控在子宫内膜周期性脱落、出血和修复机制中起重要作用。本研究结果推测子宫肌瘤内膜细胞凋亡异常可能导致子宫内膜过度增厚,脱落慢或不完全,以致出血量多或时间延长,形成异常子宫出血症状。3. GnRHa作用后,正常子宫肌层平滑肌细胞及子宫肌瘤细胞凋亡率均有不同程度的增加,这为GnRH的自分泌/旁分泌调节功能提供了更有力的佐证。同时,较之正常子宫肌层平滑肌细胞,GnRHa显著增加了子宫肌瘤细胞的凋亡率,这为GnRHa缩小子宫肌瘤的可能机制寻找了实验依据。4. GnRHa作用后,体外培养的有异常子宫出血症状的子宫肌瘤内膜细胞(无合并子宫内膜病变)的凋亡率显著高于正常子宫内膜,呈时间、剂量依赖性,说明GnRHa可能通过局部受体介导直接诱导子宫内膜细胞凋亡,改善可能因子宫内膜细胞凋亡异常而导致的子宫出血症状。

全文目录


主要英文缩写词表  3-4
中文摘要  4-7
Abstract  7-10
前言  10-13
材料与方法  13-19
结果  19-25
讨论  25-31
全文结论  31-32
参考文献  32-37
附图  37-39
综述  39-51
  参考文献  46-51
致谢  51-52

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
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