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新城疫病毒长春株NP、P、M基因的序列分析及其HN基因重组蛋白的免疫原性研究

作 者: 王承宇
导 师: 宣华
学 校: 中国人民解放军军需大学
专 业: 预防兽医学
关键词: 新城疫病毒NP基因 P基因 M基因 序列分析 HN基因 重组表达蛋白 免疫原性
分类号: S852.65
类 型: 硕士论文
年 份: 2002年
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内容摘要


从我国长春地区分离、鉴定了一株新城疫病毒(NDV),命名为长春株。对NDV长春株部分生物学特性研究结果表明,长春株能凝集鸡和人(O型血)的红细胞,不能凝集猪、牛、山羊、绵羊和马的红细胞,MDT大于168h,ICPI为0.25,IVPI为0,表明长春株为一株弱毒株。 参考新城疫病毒相关毒株基因组序列设计了3对特异性引物,通过RT-PCR一次性扩增了NDV长春株NP、P、M蛋白基因编码区(ORF)序列,序列分析结果表明,NP、P、M基因的ORF长度分别为1470、1188、1095bp,分别编码490、396和365个氨基酸,与发表的NDV La sota、B1等13株相关基因相比较,核苷酸序列同源性分别为85.7%~99.1%、82.8%~96.9%、84.3%~99.7%,推导的氨基酸序列同源性分别为92.5%~99.3%、84.3%~95.9%、88.9%~99.1%。对NP、P、M基因同源性比较和系统发育进化树分析结果表明,长春株与La sota、B1等弱毒株之间具有很近的亲缘关系,与生物学特性研究结果相一致。 用Bac-to-Bac系统表达的长春株HN重组蛋白加弗氏完全和不完全佐剂制成抗原A和B,分两次免疫15日龄雏鸡,用间接ELISA和HI测定鸡体内抗体效价,结果表明,表达的NDV HN重组蛋白能诱导鸡体产生抗NDV HN蛋白抗体和HI抗体,能够抵抗NDV强毒攻击。

全文目录


英文缩写词表  5-6
中文摘要  6-7
前言  7-9
研究内容  9-36
  实验一 NDV长春株的分离、鉴定与部分生物学特性研究  9-15
    1 材料与方法  9-10
    2 结果  10-12
    3 讨论  12-13
    4 小结  13-15
  实验二 NDV长春株NP、P、M基因的克隆与序列分析  15-29
    1 材料与方法  15-20
    2 结果  20-25
    3 讨论  25-26
    4 小结  26-29
  实验三 NDV长春株HN重组蛋白免疫原性研究  29-36
    1 材料与方法  30-31
    2 结果与讨论  31-33
    3 小结  33-36
结论  36-37
致谢  37-38
个人简历  38-39
英文摘要  39-40

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 兽医基础科学 > 家畜微生物学(兽医病原微生物学) > 家畜病毒学
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